• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : 2001LIL10078
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/2001

Résumé en langue originale

La spermiogenèse, étape finale de la spermatogenèse, se caractérise par de nombreuses modifications morphologiques aboutissant à la transformation d'une spermatide ronde en spermatozoïde. La morphogenèse de la tête du spermatozoïde avec la mise en place de l'acrosome est un des exemples les plus importants. De nombreux travaux suggèrent l'implication de l'actine filamenteuse aidée par un cytosquelette périnucléaire pour placer et étaler l'acrosome autour du noyau. Les protéines qui composent ce cytosquelette périnucléaire (ou thèque périnucléaire) ne sont pas toutes identifiées ; parmi celles qui ont été caractérisées, beaucoup sont spécifiques de la lignée germinale mâle. L'objectif de notre travail a été de rechercher parmi les protéines du cytosquelette périnucléaire celles qui se lient à l'actine filamenteuse et de rechercher leur présence, avec celle de l'actine, au cours de la spermiogenèse. Un protocole d'extraction séquentielle des protéines de la tête des spermatozoïdes associé à une étude de leur liaison à l'actine filamenteuse a permis de caractériser la liaison à l'actine de deux protéines majeures de la thèque périnucléaire : la calicine et la cylicine II. La co-localisation de l'actine et de la calicine dans la région acrosomale des spermatides rondes a été démontrée en immunocytochimie ; par ailleurs, nous avons montré que la calicine est, en solution, majoritairement présente sous la forme polymérique (homomultimère). La liaison à l'actine de la calicine est probablement liée à l'existence de domaines kelch dans sa structure alors que la cylicine II pourrait représenter une nouvelle famille de protéines de liaison à l'actine. Enfin nous nous sommes intéressés à l'isoforme 3 de la " capping protein ". Par électrophorèse bidimensionnelle, nous avons détecté une différence de séquence entre les isoformes béta 3 bovine et humaine et montré la présence d'une nouvelle forme immunologiquement proche de la sous-unité béta 3. Enfin par immunocytochimie, nous avons co-localisé l'actine et la sous-unité béta 3 de la " capping protein " dans la région acrosomale des spermatides.