Université Lille1 - Sciences et Technologies Contribution à l'étude des protéines de la thèque périnucléaire du spermatozoïde 571.845 Testicule Spermatozoïdes Protéines de liaison Spermatogenèse Protéines du cytosquelette Actine Électrophorèse bidimensionnelle Text Electronic Thesis or Dissertation fr La spermiogenèse, étape finale de la spermatogenèse, se caractérise par de nombreuses modifications morphologiques aboutissant à la transformation d'une spermatide ronde en spermatozoïde. La morphogenèse de la tête du spermatozoïde avec la mise en place de l'acrosome est un des exemples les plus importants. De nombreux travaux suggèrent l'implication de l'actine filamenteuse aidée par un cytosquelette périnucléaire pour placer et étaler l'acrosome autour du noyau. Les protéines qui composent ce cytosquelette périnucléaire (ou thèque périnucléaire) ne sont pas toutes identifiées ; parmi celles qui ont été caractérisées, beaucoup sont spécifiques de la lignée germinale mâle. L'objectif de notre travail a été de rechercher parmi les protéines du cytosquelette périnucléaire celles qui se lient à l'actine filamenteuse et de rechercher leur présence, avec celle de l'actine, au cours de la spermiogenèse. Un protocole d'extraction séquentielle des protéines de la tête des spermatozoïdes associé à une étude de leur liaison à l'actine filamenteuse a permis de caractériser la liaison à l'actine de deux protéines majeures de la thèque périnucléaire : la calicine et la cylicine II. La co-localisation de l'actine et de la calicine dans la région acrosomale des spermatides rondes a été démontrée en immunocytochimie ; par ailleurs, nous avons montré que la calicine est, en solution, majoritairement présente sous la forme polymérique (homomultimère). La liaison à l'actine de la calicine est probablement liée à l'existence de domaines kelch dans sa structure alors que la cylicine II pourrait représenter une nouvelle famille de protéines de liaison à l'actine. Enfin nous nous sommes intéressés à l'isoforme 3 de la " capping protein ". Par électrophorèse bidimensionnelle, nous avons détecté une différence de séquence entre les isoformes béta 3 bovine et humaine et montré la présence d'une nouvelle forme immunologiquement proche de la sous-unité béta 3. Enfin par immunocytochimie, nous avons co-localisé l'actine et la sous-unité béta 3 de la " capping protein " dans la région acrosomale des spermatides. application/pdf 1 : 1 Mo https://pepite-depot.univ-lille.fr/RESTREINT/Th_Num/2001/50376-2001-223.pdf Lecuyer Christophe 1900-01-01 059914130 2001LIL10078 2001-01-01 Sciences de la vie et de la santé Université Lille1 - Sciences et Technologies 026404184 Doctorat non oui Rousseaux-Prévost Roselyne 059914394 ddc:570 ASCII PDF 9999 restriction 2012-01-01 9999-01-01 restriction 2012-01-01 9999-01-01