• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1991

Résumé en langue originale

La cyclomaltodextrine glucanotransférase ou CGTase (EC.2.4.1.19) de Bacillus circulans E 192 est purifiée à grande échelle à l'aide d'un copolymère de bêta-cyclodextrine, puis caractérisée. Le site actif est étudié selon un modèle comprenant un site du donneur et un site de l'accepteur. L'acarbose est spécifique du site du donneur et la salicine est spécifique du site de l'accepteur. Ces deux molécules sont utilisées comme agents protecteurs spécifiques, lors de modifications chimiques de la protéine par des réactifs sélectifs. Le substrat amylacé est utilisé comme agent protecteur global. Ainsi, sont mis en évidence (i) un site à haute affinité pour les grains d'amidon cru, différent du site actif, et l'importance de résidu(s) tryptophanyle(s) dans cette fonction ; (ii) la contribution d'une tyrosine dans le site actif et (iii) le rôle indispensable d'une paire d'histidines localisées au site du donneur. L'étude de ce dernier point montre qu'une mise en conformation du site du donneur est induite par l'occupation du site de l'accepteur. Cette transconformation, confirmée par dichroïsme circulaire, permet une approche plus souple du mécanisme de la cyclisation tenant compte du degré de spécificité des CGTases