Université Lille1 - Sciences et Technologies Étude des relations structure-fonction de la cyclomaltodextrine glucanotransférase de Bacillus circulans E 192 Structure-function relationships study of cyclomaltodextrin glucanotransferase from Bacillus circulans E 192 547.78 Enzymes Purification Cyclodextrines Bacillus circulans Text Electronic Thesis or Dissertation fr La cyclomaltodextrine glucanotransférase ou CGTase (EC.2.4.1.19) de Bacillus circulans E 192 est purifiée à grande échelle à l'aide d'un copolymère de bêta-cyclodextrine, puis caractérisée. Le site actif est étudié selon un modèle comprenant un site du donneur et un site de l'accepteur. L'acarbose est spécifique du site du donneur et la salicine est spécifique du site de l'accepteur. Ces deux molécules sont utilisées comme agents protecteurs spécifiques, lors de modifications chimiques de la protéine par des réactifs sélectifs. Le substrat amylacé est utilisé comme agent protecteur global. Ainsi, sont mis en évidence (i) un site à haute affinité pour les grains d'amidon cru, différent du site actif, et l'importance de résidu(s) tryptophanyle(s) dans cette fonction ; (ii) la contribution d'une tyrosine dans le site actif et (iii) le rôle indispensable d'une paire d'histidines localisées au site du donneur. L'étude de ce dernier point montre qu'une mise en conformation du site du donneur est induite par l'occupation du site de l'accepteur. Cette transconformation, confirmée par dichroïsme circulaire, permet une approche plus souple du mécanisme de la cyclisation tenant compte du degré de spécificité des CGTases application/pdf 1 : 1 Mo https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Th_Num/1991/50376-1991-248.pdf Villette Jacques 1900-01-01 132939258 1991LIL10143 1991-01-01 Sciences de la vie et de la santé Université Lille1 - Sciences et Technologies 026404184 Doctorat non oui Bouquelet Stéphane 113481772 ddc:540 ASCII PDF 9999