• Langue : Anglais
• Discipline : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Identifiant : 2025ULILS058
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 17/11/2025

Résumé en langue originale

La sclérodermie systémique (ScS) est une maladie hétérogène caractérisée par de l'auto-immunité, une vasculopathie et une fibrose excessive. Les anticorps antinucléaires (ANA) sont des biomarqueurs clés de la ScS, néanmoins leur rôle dans la physiopathologie de la maladie est débattu. Cette thèse vise à explorer le rôle des ANA dans la ScS et à décrire les mécanismes impliqués. Tout d'abord, nous avons évalué les signatures omiques des fibroblastes (FB), qui sont les cellules clés de la fibrose, et des cellules endothéliales (CE), qui jouent un rôle clé dans la vasculopathie, en présence d'IgG totales purifiées provenant de patients atteints de ScS. Concernant les FB, les IgG totales de patients ont induit un phénotype pro-fibrosant de manière dépendante du sérotype d'ANA, avec un effet plus prononcé des anticorps anti-topisomérase-1 (ATA). Concernant la CE, nous avons identifié trois groupes de profils omiques distincts selon sur les sous-types d'ANA : patient ATA+, patients positifs pour les anti-centromères et un troisième groupe composé de patients positifs aux anticorps anti-ARN polymérase III, de patients atteints de lupus systémique et de sujets sains. Ces données suggèrent un rôle pathogène direct des ANA. Nous faisons l'hypothèse que les ANA pénètrent dans les cellules cibles et interagissent avec les antigènes intracellulaires.Deuxièmement, nous avons évalué la pénétration cellulaire des ANA, en nous concentrant sur les ATA, et nous avons caractérisé leur trafic intracellulaire en microscopie confocale et en imagerie cellule vivante. Nous avons démontré que les ATA et d'autres sérotypes d'ANA pénètrent rapidement dans les FB et EC, s'accumulent dans le compartiment nucléaire et interagissent avec leurs antigènes nucléaires.

Résumé traduit

Systemic sclerosis (SSc) is a heterogeneous connective tissue disease characterized by autoimmunity, vasculopathy and excessive fibrosis. Antinuclear antibodies (ANA) are key biomarkers in systemic sclerosis (SSc), but their role in disease pathology is unclear. This thesis aims to explore ANA's role in SSc and describe the involved mechanisms. Firstly, we evaluated the omics signatures of fibroblasts (FB), which are central to fibrosis, and endothelial cells (EC), which play a key role in vasculopathy, in the presence of total purified IgG from patients with systemic sclerosis (SSc). In FB, patient-derived IgG induced activation and a pro-fibrotic secretory phenotype in an ANA-dependent manner with a pronounced effect of anti-Topisomerase-1 antibodies (ATA). In EC, proteomic profiling identified three distinct patient clusters aligned with ANA subtypes: ATA+, ACA+, and a third group composed of anti-RNA polymerase III-positive patients (ARA), systemic lupus patients, and healthy controls. These data suggested an ANA's direct pathogenic role. We hypothesized that ANA could enter cells and interact with intranuclear antigens. Secondly, we assessed the cell penetration of ANA, with a focus on ATA, and characterized their intracellular trafficking using confocal microscopy and live-cell imaging. We demonstrated that ATA and other ANA serotypes rapidly penetrate live FB and EC, accumulate in nuclear compartments with a clear serotype-dependent gradient, and co-localize with their cognate nuclear antigens. IgG were predominantly internalized via clathrin-mediated endocytosis, and following uptake, trafficked through the endosomal system in a potentially microtubule-dependent manner. These results imply that ANA are involved in SSc, necessitating further mechanistic and in vivo studies to evaluate the exact mechanisms of pathogenicity.