• Langue : Français
• Discipline : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Identifiant : 2023ULILS011
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 26/01/2023

Résumé en langue originale

La leucémie myéloïde aiguë (LAM) se caractérise par une prolifération accrue de progéniteurs ou de précurseurs hématopoïétiques (blastes) des différentes lignées myéloïdes. Les études menées chez les patients atteints de LAM ont révélé une immunodéficience des cellules T, caractérisée par une diminution du nombre de TRECs dans les lymphocytes T périphériques et un répertoire oligoclonal. Pour étudier le dysfonctionnement du thymus au cours de la leucémie aigue myéloïde, nous avons utilisé un modèle de souris LAM et des échantillons de patients. Nous avons, précédemment, montré que CCL2, une protéine chimiotactique, était impliquée dans l'atrophie thymique observée au cours de la LAM. D'autres études ont également mis en évidence le rôle de cette chimiokine dans la migration périphérique des thymocytes. Etant donné que les patients atteints de LAM présentent de forts taux sériques de CCL2, nous avons évalué l'expression de CCR2 sur les cellules T naïves récemment émigrées du thymus (RTE). Les résultats ont révélé qu'il n'y avait pas de différence significative entre les RTE exprimant CCR2 chez les donneurs sains par rapport aux patients atteints de LAM.Un autre axe de nos recherches a porté sur l'observation de la mort massive des thymocytes au cours de la LAM. Nous avons réalisé un immunophénotypage, par cytométrie en flux, des différentes populations thymiques et les avons triées. Nos résultats ont montré une mort préférentielle (en plus de l'apoptose) de la population CD4+ CD8+ (DP) par nécroptose. En parallèle, nous avons démontré qu'il y avait une augmentation de l'expression de TNF-R1, RIPK3, MLKL et de sa forme active phosphorylée MLK-p (ser345) chez les souris leucémiques par comparaison aux animaux contrôles. L'ajout de TNF-alpha recombinant in vitro sur des thymocytes en culture a confirmé la mort des cellules DP par nécroptose.Cette étude nous a permis de démontrer que le TNF-α joue un rôle délétère dans la fonction thymique au cours de la LAM en contribuant à la perte massive des thymocytes DP. Nous avons également démontré que la voie de signalisation CCL2/CCR2 ne semble pas être impliquée dans une migration périphérique excessive des thymocytes chez les patients atteints de LAM.

Résumé traduit

Acute myeloid leukemia (AML) is characterized by an increased proliferation of hematopoietic progenitors or precursors (blasts) of the different myeloid lineages. Studies in AML-affected patients revealed a T-cell immunodeficiency, characterized by a decreased number of peripheral T lymphocytes' TRECs and an oligoclonal repertoire. To study thymus dysfunction during AML, we used an AML mouse model and patients' samples. We previously showed that CCL2, a chemotactic protein, was involved in the thymic dysfunction observed during AML and recent studies have demonstrated its role in thymocytes' peripheral migration. As elevated rates of CCL2 can be detected in the sera of AML affected patients, we addressed the role of CCL2 in thymic emigration. We immunophenotyped naïve recent thymic emigrant (RTE) T cells for their CCR2 expression, we found no significant difference in CCR2+-expressing RTE in healthy versus AML donors.Another axis of our researches was to analyze the massive death of thymocytes we observed in our AML mouse model. We showed that leukemic mice presented a significant death of CD4+CD8+ (DP) thymocytes associated to a necroptotic mechanism demonstrated by immunophenotyping (Annexin V, IP), increased expressions of TNF-R1, RIPK3 and phosphorylated MLKL compared to control animals. We also performed in vitro studies using recombinant TNF-alpha and confirmed the necroptosis of DP thymocytes.In this study, we demonstrated that TNF-α plays a deleterious role in thymic function during AML by contributing to extensive DP thymocytes' loss and that CCL2/CCR2 signaling pathway does not seem involved in any disproportionate thymocytes' migration to the periphery in AML patients.