• Langue : Français
• Discipline : Pharmacie
• Identifiant : 2017LIL2E053
• Type de thèse : Doctorat de pharmacie
• Date de soutenance : 11/05/2017

Résumé en langue originale

Introduction La caractérisation de la qualité spermatique repose actuellement sur le spermogramme qui ne permet pas toujours d’expliquer l’infertilité du couple. Il est nécessaire d’approfondir les connaissances de la qualité des gamètes notamment du spermatozoïde. La maturation épididymaire du spermatozoïde conduit à des modifications post-traductionnelles des protéines spermatiques (Sloboda, 2009). Ce travail est axé sur l’expression de l’une d’elles, l’AKAP4, protéine majoritaire de la gaine fibreuse du flagelle, qui semble nécessaire à la mobilité spermatique. Les altérations de la qualité nucléaire du spermatozoïde sont associées à des taux plus faibles de grossesse tant naturelle qu’en AMP (Cissen et al., 2016). De plus, il a pu être mis en avant, chez les hommes présentant des paramètres spermatiques normaux, une association entre fragmentation de l’ADN spermatique et la mobilité spermatique (Belloc et al., 2014). Après avoir évalué la relation entre ‘expression de l’AKAP4 et les paramètres du spermogramme - spermocytogramme, l’objectif de ce travail est de déterminer s’il existe un lien entre l’expression de l’AKAP4 et la fragmentation de l’ADN spermatique dans le sperme humain. Matériel et méthodes Cette étude est réalisée sur des échantillons de sperme d’hommes aux paramètres spermatiques normaux en bilan d’infertilité. Les échantillons sont préparés individuellement. En vue de l’analyse protéique, le sperme est préparé selon trois procédés distincts : sperme entier (n = 11), sperme lavé en milieu de culture Ham’s F12 afin d’éliminer les protéines du plasma séminal (n = 38) et spermatozoïdes sélectionnés par gradient de densité (n = 12). L’analyse de l’expression de l’AKAP4 est réalisée par western blot. La technique de TUNEL avec évaluation d’au moins 500 spermatozoïdes permet de définir pour chaque échantillon le taux de fragmentation de l’ADN spermatique. Résultats L’évaluation de l’expression de l’AKAP4 dans le sperme entier et lavé met en évidence un clivage partiel de la proAKAP4 en AKAP4 (proAKAP4 / (proAKAP4 + AKAP4) = 0,56 ± 0,04). Dans les spermatozoïdes sélectionnés par gradient de densité, ce rapport reste inchangé (p = 0,26). Ce ratio est corrélé de façon négative à la fragmentation de l’ADN spermatique (r= -0,64 ; p = 0,0024). L’étude de l’expression de l’AKAP4 met en évidence une corrélation entre la quantité d’AKAP4 et la numération spermatique d’une part (r = 0,8273 ; p = 0,0014) (sperme entier) et entre la quantité d’AKAP4 et la morphologie spermatique (r = 0,4889 ; p = 0,0009) (sperme lavé). Conclusion Cette étude propose une évaluation de la qualité spermatique en intégrant au spermogramme conventionnel la qualité protéique et nucléaire du spermatozoïde.

Résumé traduit

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