• Langue : Français
• Discipline : Pharmacie. Biologie médicale
• Identifiant : 2016LIL2E056
• Type de thèse : Doctorat de pharmacie
• Date de soutenance : 27/05/2016

Résumé en langue originale

Introduction : En allogreffe de cellules souches hématopoïétiques, la greffe haploidentique se présente de plus en plus comme une alternative lorsqu’un receveur ne dispose pas de donneur HLA-identique. L’immuno-incompatibilité est élevée dans cette greffe intra-familiale et, pour limiter la réaction du greffon contre l’hôte, des traitements immunosuppresseurs lourds sont administrés chez le patient en post-greffe, tels que le cyclophosphamide, molécule cardiotoxique. Différentes alternatives sont à l’étude pour maîtriser l’alloréactivité de ce type de greffon. Dans ce contexte, notre objectif est d’élaborer un protocole de déplétion partielle et sélective en lymphocytes T CD4+ CCR7+ des greffons haploidentiques de Cellules Souches Périphériques. Leur proportion élevée au sein d’un greffon expose à un risque accru de réaction aiguë du greffon contre l’hôte. Matériel et méthodes : Les procédures de tris des lymphocytes sont automatisées sur l’AutoMACS Pro (Miltenyi Biotec). Les rendements des tris sont évalués par analyse immunophénotypique par cytométrie en flux. Résultats : La stratégie d’un double tri positif CD4 CCR7 pour éliminer les lymphocytes T CD4+ CCR7+ s’est avérée irréalisable en raison du non-détachement des billes couplées aux anticorps anti-CD4 de la surface des cellules CD4+. Notre alternative a été de développer une stratégie reposant sur un tri simultané CD8-CD19 suivi d’un tri CCR7 sur la fraction négative issue du premier tri. Tous nos choix dans l’établissement de cette stratégie ont été guidés par une applicabilité future en clinique. Conclusion et perspectives : Après avoir mis au point le protocole de déplétion, il reste à vérifier que le greffon déplété remplisse les conditions en matière de préservation du nombre et viabilité des progéniteurs, préservation de l’immunité anti-infectieuse et réduction du potentiel alloréactif. Ce sont les prérequis pour envisager un passage à un essai clinique de phase I/II.