• Langue : Français
• Discipline : Pharmacie
• Identifiant : 2024ULILE143
• Type de thèse : Doctorat de pharmacie
• Date de soutenance : 14/10/2024

Résumé en langue originale

Contexte : La leucémie aiguë myéloïde CD19+ est une hémopathie maligne rare au pronostic défavorable. Le CHU de Lille développe une production académique de cellules CAR-T anti-CD19 pour traiter cette pathologie, non couverte par les industriels. L'autorisation de l'agence nationale de sécurité du médicament et des produits de santé nécessite la validation de l'efficacité et de la fonctionnalité des cellules CAR-T pour chaque lot produit. Méthode : Après une mise au point technique, la cytotoxicité in vitro de deux lots différents de cellules CAR-T est évaluée par coculture avec des lignées CD19+, telles que RAJI, et des lignées blastiques myéloïdes MOLM-13 (CD19- et CD19+). La viabilité cellulaire est analysée par cytométrie en flux via le marqueur 7- Aminoactinomycine. La fonctionnalité est mesurée par enzyme-linked immunospot (ELISpot), évaluant la sécrétion d'interféron gamma (IFN-ɣ). Résultats : Les deux lots de cellules CAR-T testés ont montré une cytotoxicité progressive au fil du temps, atteignant à H30 un taux supérieur à 85% sur les lignées RAJI et MOLM-13 CD19+. En revanche, pour la lignée MOLM-13 CD19-, ce taux reste inchangé, en présence ou non de cellules CAR-T. Par ailleurs, le test ELISpot a confirmé la libération d'IFN-ɣ avec les lignées RAJI et MOLM-13 CD19+ en contact avec les cellules CAR-T, attestant de leur fonctionnalité. Conclusion : La validation de ces tests de cytotoxicité et de fonctionnalité permettra de soumettre une demande d'essai clinique pour offrir une nouvelle option thérapeutique aux patients atteints de LAM CD19+ sans alternative de traitement.