• Langue : Français
• Identifiant : LILU_SMIS_2019_097
• Faculté/Ecole : ILIS
• Date de soutenance : 01/01/2019
• Type de mémoire : Mémoire de Master
• Discipline : Ingénierie de la santé

Résumé

Le récepteur nucléaire PXR (Pregnane X Receptor) est un acteur important de la régulation des mécanismes de détoxification en régulant l’expression de gènes impliqués dans le métabolisme. Ce travail a pour objectif de mieux connaître les voies de signalisation du récepteur PXR chez le poisson-zèbre (zf). Dans ce but, nous nous sommes intéressés à un ligand spécifique du récepteur zfPXR, le clotrimazole et un ensemble de gènes PXR régulés (cyp2aa12 ; cyp3a65 ; cyp3c1 ; nr1i2). Parallèlement, un ligand spécifique du récepteur zfAhR, la dioxine et un ensemble de gènes zfAhR régulés (cyp1a ; ahr2) ont été choisies, des travaux ayant montré des interactions entre voies zfAhR- et zfPXR-régulés. Une double approche in vitro / in vivo a été développée, comportant culture primaire d’hépatocytes de poissons-zèbre et embryons de poissons-zèbre à différents stades de développement. Les résultats obtenus par qPCR ont permis de montrer une expression constitutive de gènes cibles dans les deux modèles biologiques et une dérégulation des gènes par la TCDD et le clotrimazole dépendantes du temps d’exposition, de la période du développement ou de la concentration. Les résultats vont dans le sens d’une interactions croisés bidirectionnelles entre les voies zfAhR- et zfPXR-régulés

Résumé traduit

The Pregnane X Receptor (PXR) nuclear receptor is an important protagonist in the regulation of detoxification mechanisms by regulating the expression of genes involved in metabolism. The objective of this work is to better understand the signalling pathways of the PXR receptor in zebrafish (zf). To this end, we have focused on a specific ligand of the zfPXR receptor, clotrimazole and a set of regulated PXR genes (cyp2aa12; cyp3a65; cyp3c1; nr1i2). In parallel, a specific ligand of the zfAhR receptor, dioxin and a set of regulated zfAhR genes (cyp1a; ahr2) were selected, due to the presence of studies showing interactions between zfAhR- and zfPXR-regulated pathways. A dual in vitro / in vivo approach was developed involving primary culture of zebrafish hepatocytes and zebrafish embryos at different stages of development. The results obtained by qPCR showed constitutive expression of target genes in both biological models and gene deregulation by TCDD and clotrimazole depending on exposure time, developmental period or concentration. The results point in the direction of a bidirectional crosstalk between the zfAhR- and zfPXR-regulated pathways