Titre original :

Mise en évidence des RNA polymérases DNA dépendantes des cellules KB et recherche d'activités phosphokinasiques contaminantes

  • Langue : Français
  • Discipline : Science de la vie
  • Identifiant : Inconnu
  • Type de thèse : Doctorat
  • Date de soutenance : 01/01/1975

Résumé en langue originale

Dans une première partie du travail présenté, les RNA polymérases Dna dépendantes ont été extraites des cellules KB. Plusieurs méthodes de caractérisation de ces enzymes ont été employées : la chromatographie sur colonnes échangeuses d'ions, la sédimentation en gradient linéaire de glycérol. Ces études nous ont permis de mettre en évidence 3 types RNA polymérasiques. Nous avons étudié le rôle de la force ionique, des cofacteurs métalliques et du type de DNA utilisé comme matrice, vis-à-vis de la transcription par différentes RNA polymérases. Les extraits enzymatiques ont été également étudiés dans les cellules KB infectées par l'adénovirus 2, les 3 classes de polymérases ont été retrouvées, mais aucune nouvelle forme de RNA polymérases n'a été détectée. Dans un second temps, nous avons examiné la présence de 2 activités phosphokinasiques dans les extraits de RNA polymérases à savoir : une phosphotransférase qui échange le radiophosphore en du alpha-32P ATP ou du alpha32 - P GTP sur du GTP ou de l'ATP-une phosphokinase qui fixe le 32P sur des macromolécules non ribonucléiques. L'évaluation de ces 2 activités s'est avérée très importante pour déterminer la quantité exacte de 32P XTPincorporée en position 5' terminale des RNA néosynthétisés lors de l'étude du déclenchement de la transcription, in vitro.

AUTEUR

  • Trentesaux, Chantal
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