• Langue : Français
• Discipline : Génétique microbienne
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/2001

Résumé en langue originale

L'implication des enzymes de débranchement, tout particulièrement de l'isoamylase, dans la biosynthèse de l'amylopectine semble désormais acquise. Une mutation au locus sta7 de l'algue verte unicellulaire chlamydomonas reinhardtii entraîne un arrêt total de la synthèse d'amidon et l'apparition d'un polysaccharide soluble hyperbranché : le phytoglycogène. A l'instar des végétaux supérieurs, la présence de phytoglycogène laisse présager la défectuosite d'une enzyme de débranchement. Dans ce travail, nous déterminons dans un premier temps quelles sont les enzymes responsables de la production du phytoglycogène. La découverte d'un nouveau locus (STA8) nous ouvre une nouvelle voie vers la compréhension du rôle de l'isoamylase dans la biosynthèse de l'amylopectine. Ce locus, lorsqu'il est muté, provoque non pas la disparition (comme c'est le cas chez le mutant sta7) mais une réduction de l'activité de l'enzyme. Ceci a pour conséquence une diminution de la quantité d'amidon accumulée avec encore une fois apparition concomitante de phytoglycogène. Cette diminution d'activité n'explique pas a elle seule le phénotype observé. Les analyses génétiques et biochimiques detaillées des deux mutations sta7 et sta8 révèlent la présence d'un complexe enzymatique de haute masse responsable de l'activité isoamylasique chez Chlamydomonas. La mutation sta8 entraîne un défaut d'architecture de ce complexe qui reste malgré tout actif alors que la mutation sta7 provoque sa disparition. La structure du complexe isoamylasique s'avère donc être un facteur déterminant pour la biosynthèse correcte de l'amylopectine.