Titre original :

Caractérisation cytologique et biochimique du réseau supra-embryonnaire présent au cours de la formation des embryons somatiques de chicorée

  • Langue : Français
  • Discipline : Génie enzymatique, bioconversion et microbiologie
  • Identifiant : 2000LIL10002
  • Type de thèse : Doctorat
  • Date de soutenance : 01/01/2000

Résumé en langue originale

Chez un cichorium hybride, l'embryogenese somatique directe et unicellulaire a ete induite a partir de racines. Nous avons initie la caracterisation cytologique et biochimique du reseau fibrillaire reliant les cellules peripheriques de l'embryon au stade globulaire. La microscopie electronique a haute resolution a permis de decrire sa structure bi-dimensionnelle composee de fibres epaisses localisees uniquement a la surface de l'embryon avant la formation du protoderme. Ce reseau, appele reseau supra-embryonnaire, semble etre issu d'une enveloppe provisoire isolant le jeune embryon des cellules du parenchyme. Cette meme structure fibrillaire reticulee a egalement ete observee dans d'autres taxons. Une immunolocalisation nous a permis de mettre en evidence la nature partiellement pectique non esterifiee du reseau supra-embryonnaire. L'ensemble de ces resultats nous a conduit a considerer ce reseau comme un stade intermediaire au cours de l'embryogenese somatique au moment ou un equilibre entre cohesion et extensibilite est necessaire. Une etude ultrastructurale de la paroi externe des cellules embryonnaires au cours de l'embryogenese a revele l'existence d'une architecture specifique du stade de developpement de l'embryon. Une cinetique regroupant les principales etapes de differenciation parietale montre la presence transitoire et la localisation de ce reseau. Des traitements destabilisants le cytosquelette des embryons de cichorium suggere l'implication de ce reseau dans le continuum paroi-membrane-cytosquelette. L'analyse informatique des cartes proteiques (2d-page) des milieux de traitements a permis de detecter un groupe commun de 25 proteines. L'utilisation d'anticorps monoclonaux diriges contre les proteines riches en arabinogalactanes (agps) a revele la presence de ce type de proteines dans les differents milieux de traitements ainsi que dans le milieu de conditionnement de l'embryogenese. Afin d'evaluer la relation entre les agps et l'embryogenese somatique chez ce cichorium, le reactif de yariv a ete utilise comme anticorps artificiel. Une inhibition totale, mais reversible, de l'induction est observee en presence de 250 m de yariv. Ainsi, ce reactif affecte la balance developpementale en induisant la proliferation cellulaire au detriment du processus embryogene.

  • Directeur(s) de thèse : Hilbert, Jean-Louis

AUTEUR

  • Chapman, Audrey
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