• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1999

Résumé en langue originale

Le virus de l'hépatite C (VHC) est un agent infectieux qui pose un problème majeur de santé publique. Aucun vaccin n'existe à l'heure actuelle et l'étude du VHC est rendue difficile, notamment car il n'existe pas de système de culture cellulaire capable de multiplier ce virus de façon efficace. Dans ce travail, nous avons entrepris l'étude du repliement et de l'assemblage des glycoprotéines d'enveloppe du VHC au sein du réticulum endoplasmique, en exprimant ces protéines à l'aide du virus de la vaccine. Il a été montré précédemment que les glycoprotéines E1 et E2 du VHC s'assemblent en complexes de deux types : le premier type correspond à des agrégats hétérogènes composés par les glycoprotéines liées entre elles par des ponts disulfures ; et le second type est un hétérodimère de E1 et E2 stabilisé par des interactions non covalentes, qui est supposé être le complexe natif. Il apparaît que l'assemblage de ce complexe natif soit lent et inefficace, quelque soit le système d'expression utilisé. Au cours de notre étude, nous avons voulu comprendre l'origine de cette tendance à l'agrégation des glycoprotéines du VHC, afin de pouvoir améliorer l'efficacité de repliement du complexe E1E2 natif. La première partie de notre travail a porté sur la caractérisation des agrégats formés par les glycoprotéines du VHC, à l'aide d'un anticorps monoclonal produit dans le laboratoire. Nous avons pu montrer que les agrégats se forment rapidement et se dégradent très lentement dans les cellules qui les expriment. De plus, nous avons constaté des variations dans le niveau d'expression des agrégats au sein des cellules infectées. Enfin, de façon inattendue, nous avons mis en évidence le partage d'un épitope commun entre les agrégats glycoprotéiques du VHC et une protéine cellulaire. Cette dernière observation suggère que les agrégats du VHC pourraient être à l'origine de la production d'autoanticorps chez les patients infectes par le VHC, et que la tendance à l'agrégation des glycoprotéines pourrait être une propriété intrinsèque du virus. Dans un second temps, nous avons montré la participation des chaperons BiP, calnexine et calréticuline dans le repliement assisté des glycoprotéines E1 et E2 du VHC. Il apparaît que les chaperons BiP et calréticuline interagissent avec les glycoprotéines du VHC engagées dans la voie non productive de formation des agrégats, et que la calnexine s'associe aux hétérodimères non covalents engagés dans la voie productive d'assemblage des complexes natifs. Dans ce cadre, la calnexine semble participer à certaines étapes cruciales du repliement des glycoprotéines E1 et E2 du VHC, tel que la formation des ponts disulfures intramoléculaires, préalablement à leur assemblage en complexes natifs. La surexpression de ces différents chaperons n'a pas permis d'augmenter l'efficacité de repliement des glycoprotéines virales, suggérant la nécessité d'un équilibre de l'activité des ces protéines pour un repliement optimal des glycoprotéines du VHC. Un des buts à long terme de l'étude du repliement et de l'assemblage des glycoprotéines du VHC est de pouvoir améliorer l'efficacité