• Langue : Français
• Discipline : Génétique microbienne
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1999

Résumé en langue originale

Chez Chlamydomonas reinhardtii, comme chez les végétaux supérieurs, la synthèse de l'ADP-glucose catalysée par l'ADP-glucose pyrophosphorylase représente l'étape majeure du contrôle du flux de carbone dans la voie de biosynthèse de l'amidon. Trois mutations dans deux loci distincts conduisent à l'altération de l'activité ADP-glucose pyrophosphorylase. Les mutations sta1-1 (mutation aux rayons X) et sta1-2::ARG7 (obtenue par insertion) aboutissent au même phénotype. L'enzyme devient insensible à son activateur allostérique, le 3-phosphoglycérate, mais reste néanmoins sensible à l'inhibition par le phosphate inorganique. Ceci est suffisant pour réduire de 90% la quantité d'amidon accumulée par les souches mutantes. La mutation sta6-1::ARG7 (obtenue par insertion) est responsable de l'effondrement de la synthèse d'amidon et de la disparition de l'activité ADP-glucose pyrophosphorylase. L'ADNc de la grande sous-unité de l'ADP-glucose pyrophosphorylase a précédemment été cloné. Nous avons dans ce travail cloné et séquencé l'ADNc complet de la petite sous-unité. Les petite et grande sous-unités de l'ADP-glucose pyrophosphorylase Chlamydomonas reinhardtii sont apparentées à leurs homologues chez les plantes. Ce résultat apporte une preuve supplémentaire de la validité de notre algue comme modèle pertinent pour la synthèse d'amidon chez les végétaux. Une étude de l'expression des ARNm de la petite sous-unité, chez des cellules synchronisées en cycle jour/nuit (12h/12h) a été réalisée. Celle-ci laisse supposer l'existence d'une régulation du gène de la petite sous-unité par la lumière et/ou l'horloge circadienne. Une analyse génétique originale effectuée sur la descendance de zygotes triploïdes a permis de positionner les loci STA1 et STA6 sur le même groupe de liaison (le chromosome III) avec sta6 lié à NIT2. La coségrégation entre les phénotypes des descendants déficients pour la synthèse d'amidon et les profils d'hybridation moléculaires spécifiques révélés par les ADNc de la petite et de la grande sous-unité nous amène à conclure que STA1 et STA6 codent respectivement la grande et la petite sous-unité de l'ADP-glucose pyrophosphorylase.