• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé. Biochimie
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1997

Résumé en langue originale

La production de protéines recombinantes dans le système baculovirus/cellules d'insectes est aujourd'hui en plein essor. Au cours de nos travaux, nous avons étudié le potentiel de glycosylation des lignées de lépidoptères détenues par la société PROTEINE PERFORMANCE et l INRA de St Christol-les-Alès. Premièrement, nous avons étudié les N-glycannes de la lactoferrine bovine produite chez Mamestra brassicae. La glycosylation est fonction du site de glycosylation, les sites porteurs de structures oligomannosidiques dans la glycoprotéine naturelle sont en majorité porteurs de structures oligomannosidiques lourdes (Man5-9GlcNAc2) dans la glycoprotéine recombinante. En revanche, le site Asn476 naturellement substitué par des glycannes N-acétyllactosaminiques est porteur pour une faible part de structures hybrides (Man3-4GlcNAc3) et, surtout de glycannes légers (Man2-3[Fuc0-1]GlcNAc2) pouvant provenir du catabolisme de structures N-acétyllactosaminiques en voie de bios ynthèse. Dans un deuxième temps, nous avons étudié la O-glycosylation de trois lignées cellulaires au moyen de lectines et par la mesure des activités glycosyltransférasiques impliquées dans la biosynthèse des O-glycannes. Les lignées Spodoptera frugiperda et Trichoplusia ni expriment des O-glycoprotéines essentiellement substituées par l'antigène Tn (GalNAcAlpha1-O-Ser/Thr), que nous avons associé à une forte activité polypeptide N-acétylgalactosyltransférase. Par contre, l'activité core-1 Beta1,3-galactosyltransférase est très faible chez toutes les lignées de lépidoptères, ce qui explique la faible synthèse d'antigène-T (GalBeta1-3GalNAcAlpha1-O-Ser/Thr). La lignée Mamestra brassicae se singularise par la présence d'activité Alpha1,4-galactosyltransférase responsable de la synthèse de la structure O-glycannique GalAlpha1-4GalBeta1-3GalNAcAlpha1-O-Ser/Thr. Cette activité alpha-galactosyltransférasique nous a permis de synthétiser le composé GalAlpha 1-4GalBeta1-3GalNAcAlpha1-O-benzyl qui est capable d'inhiber l'agglutination des hématies Pk1 et Pk2 par les anticorps anti-Pk, spécifiques du glycosylcéramide GalAlpha1-4GalBeta1-4GlcBeta1-Cer.