• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1997

Résumé en langue originale

Au cours de son developpement dans l'hematie, plasmodium falciparum est soumis a un choc oxydant qui peut etre lethal pour le parasite. Celui-ci doit donc mettre en place un systeme de defense dirige contre les especes activees de l'oxygene. En effet, une sod qui constitue la premiere enzyme impliquee dans le systeme enzymatique antioxydant a ete caracterisee chez ce parasite (becuwe et coll., 1996). La nature fer dependante probable de cette enzyme qui se distingue de celles de l'hote (cu/zn et mn dependantes) laisse supposer qu'elle puisse etre un bon candidat pour un ciblage medicamenteux. Ce travail de these avait donc pour principal objectif de caracteriser de facon approfondie la sod de p. Falciparum. La proteine native ne pouvant etre obtenue qu'en tres faible quantite, nous avons exprime une proteine recombinante dans une souche de e. Coli depourvue de sod a mn et a fer. L'obtention et la purification de cette enzyme nous a permis d'etudier ses caracteristiques biochimiques et biophysiques et de determiner avec certitude la nature fer dependante de cette sod. Cette enzyme dimerique contient un atome de fer par sous unite, et presente deux environnements du fer dans son site actif, ce qui est caracteristique d'un grand nombre de sod. Les deux signaux detectes en rpe correspondent a un fer ferrique haut spin present soit dans une symetrie prochement rhombique, soit dans une symetrie rhombique. D'autre part, des experiences de mutagenese dirigee ont permis de demontrer que le residu tryptophane 72 n'etait pas responsable de l'inactivation de la sod-fe de plasmodium par le peroxyde d'hydrogene. Neanmoins, l'enzyme mutee w72v presente une activite specifique et une thermostabilite plus faible que la sod sauvage, suggerant un role structural de ce residu. En parallele, nous avons realise l'etude de l'expression et de la localisation de la sod-fe dans le parasite. Cette enzyme exprimee a tous les stades du cycle intraerythrocytaire serait exportee au stade anneau dans la vacuole parasitophore puis ensuite dans les corpuscules de maurer, structures qui seraient exposees a un choc oxydant.