Université Lille1 - Sciences et Technologies Production de la lactoferrine humaine par différents systèmes d'expression : applications à l'étude de son site d'interaction avec des cibles moléculaires Production of human lactoferin in different expression systems 572.68 Protéines recombinées Glycosylation Lactoferrines Mutagénèse dirigée Text Electronic Thesis or Dissertation fr La lactoferrine humaine (hlf) est une proteine multifonctionnelle dont les activites anti-microbiennes, anti-fongiques, anti-virales et anti-tumorales sont liees a la defense immunitaire de l'hote. Ces nombreuses proprietes biologiques nous ont amene, d'une part, a nous interesser a l'expression de la hlf native en vue d'applications therapeutiques. D'autre part, afin de poursuivre les travaux entrepris au laboratoire sur la caracterisation du site d'interaction de la hlf avec ses cibles moleculaires, nous avons exprime et etudie des hlfs modifiees par mutagenese dirigee. Ces deux objectifs ont ete abordes en exprimant la hlf dans les cellules bhk, les cellules d'insectes infectees par un baculovirus recombinant et le tabac transgenique. Dans les trois cas, l'adnc de la lactoferrine a ete clone avec son propre peptide signal. Lors de l'expression dans du tabac transgenique, une seconde construction moleculaire a ete realisee par fusion du peptide signal de la sporamine de patate douce a la sequence de la lactoferrine mature. Les differentes hlfs recombinantes ont ete purifiees et leurs proprietes physico-chimiques et biologiques ont ete comparees a celles de la lactoferrine isolee du lait de femme. En particulier, la sequence n-terminale, la masse moleculaire analysee par spectrometrie de masse, la composition molaire en monosaccharides et la fixation aux cellules lymphoblastiques t jurkat et enterocytaires ht29-18c1 ont ete determinees. Les proprietes des differentes hlfs recombinantes se sont revelees semblables a celles de la proteine native a l'exception de la composition glycannique qui est specifique de chaque systeme d'expression. application/pdf 1 : 1 Mo https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Th_Num/1997/50376-1997-403.pdf Salmon Valérie 1900-01-01 119714663 1997LIL10186 1997-01-01 Sciences de la vie et de la terre Université Lille1 - Sciences et Technologies 026404184 Doctorat non oui ddc:570 ASCII PDF 9999