• Langue : Français
• Discipline : Biochimie
• Identifiant : 1997LIL10181
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1997

Résumé en langue originale

Les ovocytes des amphibiens sont enrobés par trois à huit couches de substance gélatineuse appelée gangue ovulaire, qui assure différents rôles biologiques tant au niveau de la fécondation que durant la phase embryonnaire du développement. Les principaux composés de ces gangues ovulaires sont des glycoprotéines de type mucine renfermant jusqu'a 80% de matériel glucidique. Nous nous sommes intéressé à déterminer la structure des oligosaccharides présents dans les mucines oviducales de trois espèces d'amphibiens : rana utricularia, bufo bufo et bufo arenarum. Les chaînes glycanniques de ces mucines ont été libérées de la partie peptidique et purifiées par différentes techniques de chromatographie. L'analyse structurale de ces oligosaccharides a été réalisée par résonance magnétique nucléaire, spectrométrie de masse désorption laser et méthylation. Les résultats obtenus nous ont permis de confirmer que les chaînes glycanniques des mucines oviducales d'amphibiens sont spécifiques de chaque espèce. La dernière partie de ce travail propose une méthode permettant de déterminer la séquence d'oligosaccharide-alditols en utilisant les possibilités offertes par la spectrométrie de masse, plus particulièrement en tandem, et faisant appel a une technique d'ionisation qui est l'électrospray. Cette méthode repose sur une oxydation périodique ménagée de l'oligosaccharide-alditol provoquant ainsi un clivage spécifique. Les fragments résultant sont couples a une molécule de 2-aminopyridine et purifies par chromatographie liquide haute performance. L'esms/ms de ces dérivés permet de déterminer de façon univoque la séquence des oligosaccharides et la localisation des éventuels points de branchement.