• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1996

Résumé en langue originale

A l'inverse, pour les cellules mda-mb-231, une désulfatation limitée permet d'obtenir une stimulation de la prolifération par le fgf-2. Cependant, une désulfatation plus importante rend à nouveau les cellules insensibles au fgf-2. Ceci indique que les hspg sont indispensables a l'activité du fgf-2 mais peuvent également en fonction de leur degré de sulfatation et/ou de leur quantité, réguler négativement l'activité de ce facteur de croissance. L'ensemble de nos résultats démontre le rôle primordial des hspg dans le contrôle de l'activité du fgf-2 et de la prolifération des cellules de cancer du sein Afin d'explorer le rôle des hspg dans la sensibilité des cellules épithéliales mammaires au fgf-2, nous avons purifié et caractérisé les protéoglycannes (pg) après marquage métabolique par le #3#5s sulfate, chromatographies échangeuse d'ions et de tamisage moléculaire. Nos résultats montrent que les cellules mda-mb-231 synthétisent deux fois plus d'hspg que les cellules mcf-7. Pour les cellules mda-mb-231, la plus grande proportion d'hspg est trouvée dans la couche cellulaire alors que pour les cellules mcf-7, les hspg sont principalement libérés dans le milieu de culture. Les capacités d'interaction des pg avec le fgf-2 ont été étudiés à l'aide de #1#2#5i fgf-2, sur les cellules en culture ou après immobilisation des pg sur des membranes cationiques. Les cellules mcf-7 fixent significativement moins de #1#2#5i fgf-2 que les cellules mda-mb-231. Par contre, la fixation du fgf-2 est importante au niveau des hspg libérés dans le milieu de culture et ce pour les deux types cellulaires. Les capacités des pg à modifier l'activité du fgf-2 sur les cellules épithéliales mammaires ont ensuite été analysées après modification structurale des pg à l'aide d'enzymes ou d'un inhibiteur de la sulfatation, le chlorate de sodium. La dégradation des hspg des cellules mcf-7 ou leur désulfatation empêche l'action mitogène de ce facteur de croissance. Le fibroblast growth factor 2 (fgf-2) est un facteur de croissance à large spectre d'action qui exerce son activité biologique par l'intermédiaire de deux catégories de sites de fixation : des récepteurs membranaires de haute affinité possédant une activité tyrosine kinase et des sites de liaison de basse affinité qui correspondent à des protéoglycannes de type héparane sulfate (hspg). Dans le cancer du sein, une différence de sensibilité au fgf-2 a été observée in vitro entre les cellules mcf-7 hormono-dépendantes, et les cellules mda-mb-231 hormono-indépendantes. A l'aide de technologies basées sur l'analyse d'images microscopiques, nous avons démontré que le fgf-2 stimule la prolifération des cellules mcf-7, d'une part en recrutant les cellules quiescentes et d'autre part, en diminuant la durée totale du cycle cellulaire. Par contre, il n'induit aucune modification des paramètres du cycle cellulaire sur les cellules mda-mb-231. Cependant, ces deux types de cellules sont connus pour présenter des récepteurs de haute affinité de type tyrosine kinase en quantité comparable et leur différence de sensibilité pour le fgf-2 pourrait être due aux sites de liaison de basse affinité.