• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1995

Résumé en langue originale

e semble pas correspondre à la forme trimérique de celui-ci. Cependant des molécules apparentées au TNF[Alpha] ayant une taille d'environ 50 kDa ont déjà été décrites chez les vertébrés. Pour quantifier l'immunoréactivité détectée vis-à-vis du TNF[ Alpha] dans les différents tissus du mollusque, des dosages en ELISA ont été réalisés. Dans la fraction acellulaire de l'hémolymphe, la quantité de matériel immunoréactif vis-à-vis du TNF[Alpha] a été évaluée a 61,5 pg/ml, résultat compatible avec celui rapporte chez la moule (128 pg/ml). Dans les extraits d'hémocytes, de glande digestive et de mollusques entiers, des quantités plus faibles mais néanmoins significatives de composants TNF[Alpha] immunoréactifs ont été détectées. Lors de l'infection de B. glabrata par S. mansoni, leur expression apparaît modulée. Dans l'hémolymphe en particulier, une analyse cinétique indique que la quantité de ces molécules diminue fortement (30-50%) et irréversib lement, dès la pénétration des miracidies dans les mollusques. Ce travail a été poursuivi par la recherche de séquences nucléotidiques homologues à celles du TNF[Alpha]. Le criblage d'une banque d'expression de B. glabrata avec les anticorps anti-TNF[Alpha] reconnaissant la molécule de 53 kDa en western blot a permis d'obtenir deux clones différents : OB5 et OB14. Leur séquence de 270 et 327 pb respectivement, correspondent chacune à un cadre de lecture ouvert sans interruption, soit 90 AA pour OB5 et 109 AA pour OB14. Les protéines recombinantes OB5 et OB14 ont été produites et sont reconnues spécifiquement par le sérum de criblage anti-TNF[Alpha]. Les comparaisons des séquences en acides aminés de ces protéines avec les banques de données n'ont révèle aucune homologie particulière. Cependant, des zones d'homologies avec le TNF[Alpha] peuvent être décelées. Les scores d'homologie (60-80%) et d'identité obtenus (20-40%) sont du même ordre que ceux rapporté s pour d'autres cytokines-like d'invertébrés. L'ensemble de ces observations sont discutées dans le cadre de la relation que le parasite entretient avec son hôte intermédiaire, le mollusque B. glabrata. Ces dernières années, plusieurs études ont démontré l'existence de molécules apparentées aux cytokines chez les invertébrés, en particulier chez les Urochordés, les Echinodermes, les Annélides et les Mollusques, suggérant ainsi que les cytokines pourraient avoir été conservées tout au long de l'évolution. Au cours de ce travail, nous avons confirmé la présence d'une molécule apparentée au TNF[Alpha] chez le mollusque gastéropode pulmoné Biomphalaria glabrata, hôte intermédiaire du parasite trématode Schistosoma mansoni. Des analyses immunocytochimiques ont montré la fixation d'anticorps anti-TNF [Alpha] au niveau des granules des hémocytes adhérents et non adhérents. Ces anticorps reconnaissent dans des extraits d'hémocytes, d'hémolymphe, de glande digestive et de mollusques entiers, un seul composant de 53 kDa. La taille de cette molécule mise en évidence par western blot est trois fois plus importante que celle du TNF[Alpha] humain (17 kDa), mais n