• Langue : Français
• Discipline : Physiologie et génétique moléculaire végétale
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1995

Résumé en langue originale

Après le clonage d'un ADNc nitrate réductase nous avons isolé et séquencé le gène structural nitrate réductase (nia) de la chicorée de Bruxelles (Cichorium intybus L.) par PCR. L'analyse par hybridation génomique laisse supposer la présence d'un seul gène nia par génome haploïde. Le gène de 5222 bp possède trois introns situés dans la partie molybdique et code pour une protéine de 920 acides aminés. La séquence en acides aminés de la protéine nitrate réductase (NR) de chicorée avec les NR d'autres espèces présente un taux d'homologie jusqu'à 78%. Dans les jeunes plantules l'activité nitrate réductase est 10 fois plus importante dans les racines que dans les feuilles. Nous avons pu mettre en évidence une régulation spatiale du gène nia selon la concentration en nitrate de la solution nutritive. Les hybridations in situ montrent que pour une concentration de 200 mM de nitrate le gène s'exprime d'une façon homogène dans le parenchyme de la racine ainsi que dans l'apex, tandis qu'à une concentration de 5 mM l'expression se situe principalement dans la stèle et également dans l'apex racinaire. Dans des cultures de suspensions cellulaires de chicorée, l'activité NR est maximale au 3ème jour, puis elle diminue lorsque le saccharose du milieu est épuisé. Les activités enzymatiques impliquées dans le métabolisme du saccharose (invertase [INV], saccharose synthase [SS], et saccharose phosphate synthase [SPS]) présentent le même profil que l'ANR. L'acide abscissique à 10-4 m provoque une inhibition de la croissance cellulaire, inhibe les activités INV, SS et SPS mais augmente paradoxalement l'ANR. Cet accroissement de l'ANR n'est pas lie à une modification de l'activité transcriptionnelle, mais peut éventuellement s'expliquer par un apport plus important de pouvoirs réducteurs. Une régulation post-traductionnel de la NR et de la SPS s'exerce apparemment par des réactions de phosphorylation et de déphosphorylation.