Titre original :

Approches enzymatiques de la synthèse de molécules hydroxylées par des champignons filamenteux

  • Langue : Français
  • Discipline : Sciences de la vie et de la santé
  • Identifiant : Inconnu
  • Type de thèse : Doctorat
  • Date de soutenance : 01/01/1991

Résumé en langue originale

Les principes odorants ou actifs de certaines molécules résultent souvent des groupements hydroxylés. Par hydroxylation directe ou o-déméthylation, des molécules hydroxylées en para de la fonction cétone sont obtenues. Un screening sur la benzophénone et la 44' diméthoxybenzophénone révèle qu'Aspergillus niger possède les meilleures capacités o-déméthylantes. Nous avons mis au point les conditions opératoires et un dosage par HPLC. Dans la 2ème partie divers paramètres sont étudiés. L'adition de substrat en fin de phase exponentielle améliore le rendement de la bioconversion. Avec du glucose à 10 g/l, le substrat disparaît totalement avec un rendement en 44' dihydroxybenzophénone de 65%. Les oligoéléments sont indispensables, surtout le Fe2+; une addition d'ions Fe3+ multiplie par 7 la vitesse de la réaction. L'oxygénation du milieu est indispensable. Un détergent ajouté en début de croissance puis en même temps que le substrat améliore le rendement d'environ 20%; le pH ou la lumière sont sans influence. La nature du solvant utilisé pour dissoudre le substrat est importante: le DMSO inhibe totalement la o-déméthylation. Une addition supplémentaire de substrat, 24 heures après la 1ère, améliore le rendement global. La dernière partie envisage les applications de cette réaction: elle est possible en fermenteurs mais non en milieu organique. Pendant 2 mois (18 cycles), une même masse mycélienne, immobilisée sur trame de nylon, transforme davantage de substrat qu'en fioles. Pendant 7 cycles, sur anneaux de Raschig, la vitesse de réaction est multipliée par 2 avec un rendement de 60%. Pour le substrat, un atome d'oxygène en alpha du cycle aromatique et une chaîne latérale suffisamment longue sont nécessaires

  • Directeur(s) de thèse : Sancholle, Michel

AUTEUR

  • Estrade, Patricia
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