Université Lille 2 Droit et Santé Etude tridimensionnelle de l’organe de Corti par microscopie confocale à balayage laser Cochlée, microscopie confocale, fluorescence, Fluorescence induite par laser 610 Des travaux précédents ont démontré le bénéfice de l’utilisation d’un porte électrode chargé en déxaméthasone pour la préservation auditive sur un modèle animal d’implantation cochléaire. L’analyse du mécanisme d’action précis de ce traitement requiert le développement d’outils d’analyse histologique. Ce travail a pour objectif la mise au point et validation d’un protocole de microscopie confocale à balayage laser (MCBL) en fluorescence pour l’acquisition d’images tridimensionnelles de l’organe de Corti en vue de l’évaluation des effets tissulaires de traitements délivrés à l’oreille interne. Matériel et méthode : Pour cette étude, des cochlées de souris adultes C57BL/6J ont été préparées de façon à comparer les images obtenues par dissection à une technique récente de clarification cochléaire par MSBB (méthyle salicylate et benzoate de benzyle). Les tissus ont été marqués par DAPI, Phalloïdine-TRITC et par immunofluorescence indirect pour les Neurofilaments 200 KD. Les images ont été acquises par MCBL en fluorescence (Microscope confocal inversé Zeiss LSM 710, Plate-forme d’imagerie cellulaire Lille 2) et les volumes reconstruits par informatique (logiciel Zeiss Zen) Résultats : La dissection des organes de Corti dans les cochlées adultes est rendue difficile et peu reproductible de par la calcification des tissus. La clarification cochléaire par MSBB est compatible avec l’acquisition d’images par MCBL en fluorescence. La reconstruction du volume cochléaire complet permet la réalisation d’un cytocochléogramme. Conclusion : Le microscope confocal permet l’analyse cellulaire de l’organe de Corti rendu transparent par MSBB. L’utilisation d’anticorps spécifiques immunisés contre des épitopes d’intérêt permet l’étude en immunofluorescence de l’oreille interne. Ainsi mis au point, cet outil va permettre l’étude pharmacodynamique in-situ de l’effet de traitements délivrés à l’oreille interne. ... Electronic Thesis or Dissertation Text Image fr application/pdf 1 : 0 Ko https://pepite-depot.univ-lille.fr/RESTREINT/Th_Medecine/2013/2013LIL2M208.pdf Bonne Nicolas-Xavier 1982-04-01 FR 172080797 1147 2013LIL2M208 2013-09-10 Médecine. ORL et Chirurgie cervico-faciale Université Lille 2 Droit et Santé thesis.degree.grantor_1 026404389 Doctorat de médecine non oui Vincent Christophe intervenant_1 074165062 ddc:610 Vincent Christophe Université Lille 2 Droit et Santé Université Lille 2 Droit et Santé ASCII PDF 1