• Langue : Français
• Discipline : Biochimie
• Identifiant : Inconnu
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 01/01/1989

Résumé en langue originale

La détermination de la structure peptidique des mucines a toujours représenté une difficulté technologique majeure malgré la miniaturisation et l'automatisation de la dégradation de Edman. Le caractère hautement glycosylé de ces o-glycoprotéines, leur richesse en thréonine, en sérine, en proline sont les causes essentielles de ces difficultés. Une déglycosylation préalable a donc été envisagée. Nous en avons optimisé les conditions (TFMS). La dégradation de Edman a été peu efficace et rejetée au profit de la biologie moléculaire. Le travail préliminaire à savoir purification de fragments de mucines et leur déglycosylation a alors été fort utile autorisant la préparation d'un immunsérum reconnaissant l'axe peptidique des mucines trachéobronchiques humaines. Grâce à cet immunsérum, le criblage d'une banque d'ADNc en vecteur d'expression lambda gt onze provenant de muqueuse respiratoire humaine nous a permis de sélectionner douze clones positifs. Trois familles de motifs structuraux ont pu être déduits de leurs séquences, se distinguant par l'existence ou non de zones hyperglycosylables, de domaines répétitifs ou par un agencement alterné de zones nues et de zones glycosylables. l'analyse des ARN a permis de confirmer une très grande hétérogénéité peptidique. Parallèlement nous avons pu également montrer que l'expression des mucines présentait une spécificité cellulaire (immunohistochimie) et tissulaire (analyse des ARN de différentes muqueuses humaines)