Mise au point de tests immunoenzymatiques pour la détection d'antigènes et d'anticorps spécifiques des infections à mycoplasmes uro-génitaux
- Sciences biologiques fondamentales et appliquées, psychologie : immunologie fondamentale
- m. hominis/U. urealyticum/tests immunoenzymatiques/électroélution/extraction membranaire
- Mycoplasmoses
- Technique immunoenzymatique
- Langue : Français
- Discipline : Sciences de la vie et de la santé
- Identifiant : Inconnu
- Type de thèse : Doctorat
- Date de soutenance : 01/01/1989
Résumé en langue originale
Étant donné la latence et la chronicité de l'infection par les mycoplasmes urogénitaux, M. hominis et u. urealyticum, il nous a semblé nécessaire de disposer de techniques simples et reproductibles permettant un diagnostic rapide des infections par ces microorganismes. Pour la détection d'anticorps spécifiques de ces infections, un test immunologique de type Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) est choisi. Pour son élaboration, des membranes de M. hominis et U. urealyticum ont été obtenues après lyse aux ultrasons suivie d'une centrifugation différentielle. Après avoir étudié plusieurs types de détergents, les antigènes membranaires sont solubilisés par du déoxycholate de sodium et leur antigénicité vérifiée. D'autre part les protéines 102 et 116 kD spécifiques de M. hominis sont obtenues par électroélution ; cet antigène est comparé à l'antigène membranaire soluble précèdent. Les conditions optimales du test ELISA sont étudiées à l'aide d'un immunsérum de lapin anti M. hominis et/ou U. urealyticum. La méthodologie est appliquée au diagnostic chez 150 patients. En ce qui concerne le test direct, la détection d'antigènes est effectuée par Immunobinding Assay (IBA). Des anticorps spécifiques des espèces étudiés sont préparés par immunisation des souris. Des immunoglobulines sont purifiées par précipitation au sulfate d'ammonium des immunsérums de souris suivie d'une dialyse de trois jours et d'une chromatographie d'échangeurs d'ions. La spécificité du test est étudié vis-a-vis de 5 mycoplasma et 8 ureaplasma. la technique est appliquee a l'etude de 20 prélèvements genitaux humains
- Directeur(s) de thèse : Wattré, Pierre
AUTEUR
- Liepmann, Marie-Florence