• Langue : Français, Anglais
• Discipline : Biologie
• Identifiant : Inconnu
• Type de mémoire : Habilitation à diriger des recherches
• Date de soutenance : 08/02/2013

Résumé en langue originale

Ce manuscrit relate la majeure partie des recherches que j’ai réalisées depuis mon recrutement au CNRS en 2007. Ce travail est centré sur l’étude des mécanismes de la virulence et de leur régulation chez les bactéries à gram négatif. Il est organisé en deux parties. La première partie concerne l’étude chez Bordetella. pertussis du système qui module le passage de l’état avirulent à l’état virulent de la bactérie : le système à deux composantes (TCS) BvgA/BvgS. La structure atomique du domaine senseur périplasmique de BvgS dont la nature est différente des domaines cytoplasmiques connus de TCS y est décrite et analysée. Ce système est lui même modulé par la composition du milieu dans lequel se trouvent les bactéries. Afin de caractériser les modulateurs de la virulence, nous avons également entrepris l’étude de différents transporteurs périplasmiques de B. pertussis qui a abouti à l’identification des molécules transportées ainsi que la description du mécanisme de reconnaissance de leurs ligands. La deuxième partie concerne l’étude de SopB/SigD, une inositol phosphatase multidomaines impliquée dans l’entéro-pathogénicité de Salmonella. enterica. Ce facteur de virulence est injecté dans les cellules eucaryotes par le système de sécrétion de type III (TTSS) provoquant une réorganisation du cytosquelette actine qui abouti à l’internalisation de la bactérie. Avant sa sécrétion, la protéine est maintenue dans le cytoplasme des bactéries par interaction avec une chaperonne spécifique SigE. Le but de ce projet consiste à l’étude du complexe SopB/SigE par une approche structurale afin d’avancer dans la connaissance des mécanismes de sécrétion de type III et notamment dans la reconnaissance des effecteurs par l’appareil de sécrétion lui-même. L’interaction entre SopB et SigE a pu être caractérisée par une approche biochimique, biophysique et structurale et a permis de caractériser l’interaction entre les deux protéines. L’analyse du complexe a abouti à la mise en évidence d’une structure quaternaire originale permettant de mieux comprendre les mécanismes de reconnaissance des complexes effecteur/chaperonne de type III et les composant du TTSS et a permis de proposer un mécanisme commun de sécrétion pour cette famille de facteurs de virulence. Ces résultats récents représentent un point de départ très encourageant pour la mise en place de projets d’étude du mode de fonctionnement dynamique des TTSS par des approches complémentaires comme la microscopie et la microbiologie cellulaire permettant la visualisation in sittu des mécanismes de la sécrétion.