• Langue : Français
• Discipline : Sciences naturelles
• Identifiant : Inconnu
• Type de mémoire : Habilitation à diriger des recherches
• Date de soutenance : 01/01/2007

Résumé en langue originale

-une méthode d'étude de phosphorylation ou de toute autre modification posttraductionnelle in vivo par RMN est développée. eorganisation cellulaire lors de la phase M n'est pas clairement élucidée. Via des stratégies chimiques (U0I26, inhibiteur de MEK1,2) ou oligonucléotidiques (Antisens anti-Mos de type morpholines / phosphorothioates), nous avons démontré que l'onco-protéine Mos exerce un rôle pivot dans l'activation de la voie MEK - MAPK/Erk, dans les ovocytes de Xénope, que cette cascade soit activée par l'insuline ou la progestérone. ln vivo, l'inhibition de l'accumulation de Mos ou de l'activité des MEK1,2 conduisent quel que soit le mode de stimulation à la formation de structures de type aster, incompatibles avec une bonne séparation du matériel génétique. Les expériences de restauration de l'organisation bipolaire du fuseau de division ont montré que l'oncoprotéine Mos et p90Rsk jouent des rôles différents mais complémentaires dans la morphogenèse du fuseau. Ces résultats permettent de considérer les membres de la voie MAPK/Erk non comme modules d'une cascade mais d'un r éseau où chaque module peut exercer un rôle propre et particulier. Le rôle de l'homéostasie protonique a été évalué lors de la reprise méiotique. Nous avons pu observer que les événements précoces de la reprise de méiose stimulés par la progestérone et que l'entrée en phase M induite par une MAPK/Erk active sont sensibles aux variations physiologiques de pH intracellulaire, au contraire de la boucle d'auto-amplification du MPF (M-Phase Promoting Factor). Trois collaborations (UGSF et IRI, Lille) ont été engagées sur cette période. Nous avons ainsi pu montrer que la O-glycosylation est une modification post-traductionnelle qui est nécessaire mais non suffisante pour l'entrée en phase M des ovocytes de Xénope. Une rationalisation de nos démarches scientifiques et une meilleure exploitation des données obtenues ont été commencées au travers d'un échange interdisciplinaire qui nous permettra de modéliser la cascade MAPK/Erk dans le cadre de la méiose. Enfin, Aucune cellule somatique ou système in vitro n'offre les capacités des ovocytes de Xénope quant à l'étude des mécanismes qui contrôlent le cycle cellulaire et orchestrent la réorganisation cellulaire durant la phase M. Les ovocytes de Xenopus laevis ouvrent de larges possibilités d'études biochimiques sur cellules uniques (cellules de large taille, expression de protéines hétérologues, micro-manipulation). La reprise de la méiose, analogue à une transition G2/M du cycle cellulaire, peut être stimulée par des voies Ras-dépendante (insuline) ou Ras indépendantes (progestérone). Le modèle Xenopus tropicalis, en conservant les avantages des ovocytes de X. laevis, se présente comme un modèle porteur pour les études de biologie moléculaire du développement. Les membres de la voie MAPK (Mitogen Activated Protein Kinases) ont pris une importance considérable parmi les cibles thérapeutiques potentielles en thérapies anticancéreuses, mais leur fonction dans la r´