• Langue : Français
• Discipline : Sciences naturelles. Biologie
• Identifiant : Inconnu
• Type de mémoire : Habilitation à diriger des recherches
• Date de soutenance : 01/01/2006

Résumé en langue originale

e sécrétion. La nucléoline membranaire est également probablement capable d'interagir avec les héparanes sulfates des protéoglycanes car la nucléoline interagit in vitro avec l'héparine. L'objectif est d'étudier le rôle de la glycosylation de la nucléoline dans son trafic intra-cellulaire, de caractériser l'interaction de la nucléoline membranaire avec les héparanes sulfates, d'étudier leur implication éventuelle dans le trafic et de rechercher les effets de la glycosylation de la nucléoline sur sa capacité à interagir avec ses différents partenaires. Pour cela, nous transformons actuellement des cellules en culture pour qu'elles expriment les formes de la nucléoline mutées ou non dans les sites de glycosylation et fusionnées à un épitope marqueur. La production des formes mutées ou non de la nucléoline, en quantités plus importantes, est également en cours pour étudier l'effet de la glycosylation sur la capacité d'interaction de la nucléoline avec ses l es (GAGs) et à un récepteur spécifique, présents à la surface des lymphocytes T. Ces interactions se rapprochent de celles rencontrées avec certains facteurs de croissance et les cytokines. Nous avons alors mis en évidence une augmentation de l'adhérence des lymphocytes T à la fibronectine de la matrice extra-cellulaire induite par la CyPB. La CyPB se rapproche donc des chimiokines tant par son activité que par les interactions qu'elle établit avec ses sites de fixation. Outre les régions de fixation aux GAGs et au récepteur, les résidus du site catalytique de la CyPB sont également nécessaires à l'adhérence alors qu'ils ne sont pas impliqués dans la fixation aux lymphocytes T. Ce résultat suggère qu'après la fixation aux cellules, la CyPB activerait son récepteur en l'isomérisant. Nous avons également défini que le motif glycanique minimal interagissant avec la CyPB est un octamère héparinique spécifique et que la CyPB passe la barrière hémato-encéphali igands. que pour exercer notamment une action proliférative sur les cellules neuronales. En septembre 2002, j'ai co-développé un nouveau sujet consistant en l'étude d'une glycosylation atypique et de son implication dans la régulation du trafic intra-cellulaire et des fonctions des protéines ; la nucléoline étant choisie comme protéine modèle. La nucléoline intervient dans la biogenèse du ribosome et joue un rôle clef dans la prolifération cellulaire. Elle assure également un rôle de protéine navette entre le noyau et la surface des cellules en division. Elle permet alors la régulation extra-cellulaire d'évènements nucléaires via notamment l'internalisation de cytokines et constitue ainsi une cible thérapeutique de choix contre le cancer. La nucléoline membranaire est aussi décrite comme co-récepteur du HIV Nous avons publié que les formes cytosolique, microsomale et membranaire de la nucléoline sont partiellement N- et O-glycosylées : suggérant ainsi un rôle de la glycosylation dans sa localisation cellulaire, en la dirigeant vers la voie d Mes travaux portent sur l'étude des fonctions de protéines par une approche structurale et l'étude des relations protéines/glycanes. Je m'attache tout particulièrement à l'étude de la modulation de l'activité biologique de protéines par leur interaction avec des glycanes ou par leur propre capacité à être glycosylées. Durant ma thèse, j'ai étudié les relations entre la structure et la fonction d'une protéine plasmatique, la cyclophiline B (CyPB) dont l'activité biologique était inconnue. Les cyclophilines étaient décrites comme des enzymes très conservées qui catalysent l'isomérisation cis/trans de la liaison entre la proline et un autre acide aminé. Cette activité isomérase permettrait aux cyclophilines intra-cellulaires d'intervenir dans la mise en conformation des protéines mais son rôle dans le cas de la CyPB sécrétée restait obscur. Nous avons identifié deux régions distinctes de la CyPB permettant sa fixation à des glycosaminoglycanes sulfat´