Titre original :

Mise en place d’un panel de quantification de la maladie résiduelle par cytométrie en flux multiparamétrique dans la leucémie lymphoïde chronique

Mots-clés en français :
  • Maladie résiduelle
  • cytométrie
  • leucémie lymphoïde chronique
  • FlowSOM

  • Leucémie lymphoïde chronique
  • Maladie résiduelle
  • Cytométrie de flux
  • Leucémie lymphoïde
  • Maladie chronique
  • Maladie résiduelle
  • Cytométrie en flux
  • Langue : Français
  • Discipline : Médecine. Biologie Médicale
  • Identifiant : 2019LILUM389
  • Type de thèse : Doctorat de médecine
  • Date de soutenance : 09/10/2019

Résumé en langue originale

Contexte : La Leucémie Lymphoïde Chronique (LLC) est une hémopathie B au long cours de présentation et de pronostic hétérogène, dans laquelle l’évaluation de la maladie résiduelle (MRD) prend une place grandissante pour stratifier les patients. La cytométrie en flux est la technique de choix pour sa quantification. Le panel de cytométrie utilisé au diagnostic de LLC est difficile à interpréter dans le cadre de la MRD. Le but de notre travail a consisté à mettre en place un panel d’anticorps 7 couleurs (MRD-LLC) adapté à la mesure de la MRD dans la LLC. Méthodes : Après avoir établi le protocole analytique de détection de la MRD-LLC en cytométrie, nous avons établi et comparé les performances analytiques (sensibilité, limite de détection, limite de quantification, interprétation des résultats) de l’ancien et du nouveau panel. Nous avons évalué secondairement des stratégies d’analyse peu répandues comme l’utilisation du logiciel d’analyse de cytométrie FlowSOM dans la maladie résiduelle. Résultats : L’utilisation du panel MRD-LLC améliore la sensibilité de détection des cellules résiduelles (10-3 avec l’ancien panel et 10-5 avec le nouveau) et permet une identification plus aisée des cellules résiduelles. Nous avons calculé le seuil de détection et le seuil de quantification des cellules résiduelles avec le nouveau panel MRD-LLC, pour 500 000 événements analysés (respectivement : 18 cellules, soit 0,0036% des leucocytes et 47 cellules, soit 0,0094% des leucocytes). L’analyse des données de cytométrie avec le logiciel FlowSOM apporte plus une aide visuelle qu’une amélioration de la sensibilité des résultats. Conclusion : Nous avons mis en place au laboratoire un nouveau panel de quantification de la MRD-LLC standardisé et en accord avec les recommandations de l’iwCLL2018, qui nous permettra de participer aux essais cliniques sur l’impact pronostique de la détection de la MRD LLC chez les patients concernés.

Résumé traduit

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  • Directeur(s) de thèse : Charpentier, Agnès

AUTEUR

  • Apete, Alan
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