• Langue : Français
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : 2024ULILS120
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 27/11/2024

Résumé en langue originale

Le carcinome du nasopharynx (CNP) est un cancer chimioradiosensible qui, lorsqu'il est diagnostiqué tardivement, présente des résultats thérapeutiques peu satisfaisants. Dans ces situations de récidive ou de métastase, les options thérapeutiques restent limitées et sont souvent associées à des effets secondaires significatifs. Dans ce contexte, l'immunothérapie émerge comme une alternative prometteuse, tirant parti de l'environnement immunitaire riche mais suppressif du CNP. Un des aspects clés de cet environnement est la libération abondante d'exosomes tumoraux (Exo-CNP). Des travaux au laboratoire ont montré, entre autres, que ces exosomes jouent un rôle crucial dans l'induction et le recrutement des Treg, contribuant ainsi à la création d'un environnement immunosuppressif propice à la croissance tumorale.Face à ces observations, l'objectif de cette thèse a été, dans un premier temps, de savoir si les Exo-CNP pouvaient également induire des cellules dendritiques (DC) tolérogènes, connues pour favoriser le développement tumoral par l'inhibition de la réponse des lymphocytes T. Les résultats ont révélé que les Exo-CNP favorisaient l'induction de DC matures régulatrices (mRegDC), caractérisées par une sécrétion accrue d'IL-10 et une activité enzymatique renforcée de l'IDO et de l'IL4I1 après l'étape de différenciation. Après maturation, ces cellules présentaient une réduction de la production de cytokines pro-inflammatoires (IL-6 et IL-12) et contribuaient à diminuer l'activation des lymphocytes T. En outre, il a également été démontré que les Exo-CNP favorisent la migration de ces mRegDC.Pour contrer ces mécanismes, deux stratégies thérapeutiques ont été envisagées afin de moduler ou neutraliser les Exo-CNP : une immunothérapie ciblant une protéine portée par les exosomes, et une thérapie photodynamique (PDT) utilisant le 5-ALA.En quête d'un acteur moléculaire impliqué dans l'effet suppressif des exosomes, nous avons étudié le rôle de la galectine-9. Les premières études ont montré que la gal-9S recombinante, bien qu'elle n'altère pas directement le phénotype ou le sécrétome des DC, favorise l'induction de cellules aux propriétés tolérogènes dont les fonctions peuvent être inhibées par un anticorps bloquant. Nous nous sommes ainsi attelés à évaluer le blocage de la Gal-9 exosomale, ce qui a permis de neutraliser non seulement l'effet suppresseur direct des exosomes sur les PBMC, mais aussi leur effet indirect en inhibant les fonctions suppressives des SEV-DC.En parallèle, la PDT a montré son efficacité directe sur plusieurs lignées cellulaires de CNP, induisant une mort cellulaire directe associée à la libération de ROS. De plus, la 5-ALA-PDT induit l'activation d'une réponse immunitaire se traduisant par une prolifération des lymphocytes T et une augmentation de la production de cytokines pro-inflammatoires en faveur d'une réponse immunitaire de type Th1. Enfin, une étude plus approfondie des signaux de danger et des exosomes tumoraux libérés après traitement semble suggérer leur implication dans l'activation de la réponse immunitaire.En conclusion, ces travaux ont mis en lumière deux approches complémentaires pour cibler les exosomes tumoraux qui, combinées, pourraient offrir des perspectives thérapeutiques nouvelles et plus efficaces pour les patients atteints de CNP en stade avancé.

Résumé traduit

Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is a chemoradiosensitive cancer, which, when diagnosed late, shows unsatisfactory therapeutic outcomes. In cases of recurrence or metastasis, therapeutic options remain limited and are often associated with significant side effects. In this context, immunotherapy emerges as a promising alternative, leveraging NPC's rich but suppressive immune environment. One key aspect of this environment is the abundant release of tumor-derived exosomes (Exo-NPC). Studies in the laboratory have shown that these exosomes play a crucial role in the induction and recruitment of Tregs, thus contributing to the creation of an immunosuppressive environment conducive to tumor growth.Based on these observations, the first objective of this thesis was to determine whether Exo-NPC could also induce tolerogenic dendritic cells (DCs), known to promote tumor development by inhibiting T-cell responses. The results revealed that Exo-NPC promote the induction of mature regulatory DCs (mRegDCs), characterized by increased secretion of IL-10 and enhanced enzymatic activity of IDO and IL4I1 following differentiation. After maturation, these cells showed a reduction in the production of pro-inflammatory cytokines (IL-6 and IL-12) and contributed to reduced T-cell activation. Additionally, Exo-NPC were shown to promote the migration of these mRegDCs.To counter these mechanisms, two therapeutic strategies were considered to modulate or neutralize Exo-NPC: an immunotherapy targeting a protein carried by the exosomes, and a photodynamic therapy (PDT) using 5-ALA.In the search for a molecular actor involved in the suppressive effect of exosomes, we studied the role of galectin-9. Early studies showed that recombinant gal-9S, although it does not directly alter the phenotype or secretome of DCs, promotes the induction of cells with tolerogenic properties whose functions can be inhibited by a blocking antibody. We then evaluated the blockade of exosomal Gal-9, which neutralized not only the direct suppressive effect of exosomes on PBMCs but also their indirect effect by inhibiting the suppressive functions of DC-Exo.In parallel, PDT showed its direct efficacy on several NPC cell lines, inducing direct cell death associated with ROS release. Moreover, 5-ALA-PDT induces the activation of an immune response, particularly by stimulating T-cell proliferation and increasing the production of pro-inflammatory cytokines, thus enhancing a Th1-type immune response. Finally, a more in-depth study of the danger signals and tumor-derived exosomes released after treatment suggests their involvement in the activation of the immune responseIn conclusion, this research highlighted two complementary approaches to target tumor exosomes, which, when combined, could offer new and more effective therapeutic prospects for patients with advanced NPC.