• Langue : Français, Anglais
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : 2024ULILS056
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 03/12/2024

Résumé en langue originale

Malgré les avancées dans le diagnostic et la prise en charge des cancers au cours des dernières années, le carcinome pulmonaire reste la première cause de mortalité par cancer dans le monde, tuant chaque année 1,8 millions de malades. Son agressivité est telle que son taux de survie à 5 ans n'excède pas les 20%. Représenté à 85% par le sous-type non à petites cellules, le cancer du poumon est le plus souvent diagnostiqué à des stades localement avancés, rendant la résection chirurgicale impossible. En dépit de l'essor de nouvelles thérapies puissantes telles que les immunothérapies qui ciblent les « immunes checkpoints » et les thérapies ciblées, le recours à des traitements à visées systémiques, comme les chimiothérapies cytotoxiques à base de sels de platine (cisplatine) demeure un des traitements de référence dans la prise en charge des cancers bronchiques. Bien que les puissants effets antinéoplasiques du cisplatine soient reconnus depuis des décennies, de nombreux patients sont en échec thérapeutique, notamment à cause de résistances primaires ou secondaires.MUC1 est une large O-glycoprotéine transmembranaire surexprimée dans 2/3 des cancers, dont le cancer du poumon, et est connue comme jouant un rôle dans la progression tumorale et comme étant associée à des signatures de la chimiorésistance. L'objectif de ce projet a été de mieux comprendre le rôle de MUC1 (i) sur les propriétés des cellules cancéreuses pulmonaires et (ii) dans la chimiorésistance au cisplatine, (iii) et de tester une stratégie oligonucléotide antisens afin de définir MUC1 comme nouvelle cible thérapeutique. Dans cette étude, cinq lignées d'adénocarcinomes pulmonaires ont été utilisées : quatre lignées d'adénocarcinomes pulmonaires invalidées pour l'expression de MUC1 par une stratégie CRISPR/Cas9 ou ciblées par un oligonucléotide antisens de type GapmeR (H1975, A549, HCC827 et H282), ainsi qu'une lignée d'adénocarcinome pulmonaire surexprimant de manière stable MUC1 (PC9). Des tests MTS, de prolifération, de migration et d'invasion, des western blot, des essais comètes, des immunofluorescences, de la cytométrie en flux et des qPCR ont été utilisés.Nos résultats montrent que l'expression de MUC1 (i) est associée à une augmentation de la survie, de la prolifération cellulaire, des capacités migratoires et invasives, mais aussi de la capacité à former des colonies, (ii) entraîne une chimiorésistance au cisplatine, (iii) module l'expression des pompes d'influx et d'efflux du cisplatine, (iv) protège des dommages à l'ADN, d'un arrêt du cycle cellulaire et de l'apoptose, et (v) augmente l'expression des marqueurs de cellules souches. L'utilisation d'un GapmeR ciblant MUC1 permet de diminuer ces différentes propriétés. En conclusion, nos résultats montrent que MUC1 est une actrice de la progression tumorale et de la chimiorésistance au cisplatine. Nos résultats suggèrent donc que MUC1 représente une cible thérapeutique intéressante afin de limiter la progression des cancers bronchiques non à petites cellules et d'améliorer la sensibilité aux traitements.

Résumé traduit

Despite advances in cancer diagnosis and treatment, lung cancer remains the leading cause of cancer death worldwide, killing 1.8 million patients each year. Its aggressiveness is such that its 5-year survival rate doesn't exceed 20%. Represented at 85% by the non-small cell subtype (NSCLC), lung cancer is often diagnosed at locally advanced stages making surgical resection impossible. Despites the rise of powerful therapies such as immunotherapies targeting immunes checkpoints and targeted therapies, the use of systemically treatments such as platinum-based cytotoxic chemotherapy (cisplatin) remains one of the standard treatments in the management of bronchial cancers. Although the powerful antineoplastic effects of cisplatin have been recognized for decades, many patients fail to benefit from the drug, notably due to primary or secondary resistance.MUC1 is a large transmembrane O-glycoprotein overexpressed in 2/3 of all cancers cases, included lung cancer, and is known to be a key player in tumoral progression and to be associated with chemoresistance signatures. In this context, the project aims to better understand MUC1 roles (i) on lung cancer cells properties and (ii) chemoresitance to cisplatin, and (iii) to test an antisens oligonucleotide strategy to define MUC1 as a new therapeutic target. In our project, five adenocarcinoma cell lines are used: H1975, A549, HCC827 and H292 invalidated for MUC1 expression by Crispr/Cas9 technology or knock-down by antisens oligonucleotides (ASO) as well PC9 stably overexpressing MUC1 (PC9). MTS, proliferation assays, migration/ invasion assays, immunofluorescence, western blot, comet assays and qPCR are used.Our results show that MUC1 expression (i) is associated with increased cell survival, proliferation, migratory and invasive capacities, as well as the abilities to form colonies, (ii) leads to cisplatin chemoresistance, (iii) modulates expression of cisplatin influx and efflux pumps including ABC family efflux pumps, and (iv) protects cells treated with cisplatin against DNA damages, a proliferation stop and apoptosis and (v) increases stem cells markers expressions. Moreover, targeting MUC1 with an ASO decreases all these properties.In conclusion, in NSCLC, our results show that MUC1 is an actor of tumor progression, by promoting cell survival, proliferation, migration and invasion and is also involved in cisplatin chemoresistance. Overall, our data suggest that MUC1 may represent a novel therapeutic approach to limit NSCLC progression and improve drug sensitivity, since using an ASO strategy can reverse these properties.