• Langue : Français, Anglais
• Discipline : Sciences de la vie et de la santé
• Identifiant : 2024ULILS045
• Type de thèse : Doctorat
• Date de soutenance : 05/12/2024

Résumé en langue originale

Contexte : L’asthme est une maladie inflammatoire des voies aériennes inférieures très fréquente dans la population générale. Parmi les patients asthmatiques, 5 à 10 % développent des formes sévères, caractérisées par une réponse insuffisante aux corticoïdes inhalés. Chez ces patients, le remodelage bronchique est un phénomène qui aggrave le handicap respiratoire associé à l’asthme sévère. Cependant, le remodelage bronchique reste un défi thérapeutique, en l’absence de traitement spécifique actuellement. Peu de modèles animaux réussissent à en reproduire fidèlement les caractéristiques, et c’est tout particulièrement le cas en contexte d’inflammation « T2low » des voies aériennes, caractérisée par une prédominance neutrophilique sur le plan cellulaire et par une résistance aux corticoïdes. Nous avons développé un modèle murin d’asthme induit par l’allergène de chien qui reproduit les caractéristiques du remodelage bronchique humain dans un contexte d’inflammation neutrophilique et Th17 des voies aériennes, associés à une production accrue d’IL-17A et d’IL-22.Objectifs : L’objectif de nos travaux était, d’une part, de valider la pertinence de ce modèle comme modèle d’asthme sévère corticorésistant, et, d’autre part, d’étudier l’impact thérapeutique de la neutralisation de l’IL-22 dans ce modèle.Méthodes : L’asthme était induit par l’allergène de chien, administré par voie intranasale, chez des souris C57BL/6J. Au cours de la dernière semaine de provocation par l’allergène, les souris recevaient 1 mg.kg-1 de dexaméthasone par voie intrapéritonéale pour l’évaluation de la corticorésistance du modèle. Pour l’évaluation de l’impact de la neutralisation de l’IL-22, les souris recevaient, au cours de la dernière semaine de provocation par l’allergène, trois doses de 200 μg d’anticorps anti-IL-22 à 48 heures d’intervalles. Vingt-quatre heures après la dernière injection, l’hyperréactivité bronchique était évaluée par la mesure des résistances des voies aériennes par cathétérisation trachéale, en réponse à des doses croissantes de méthacholine nébulisée. L’inflammation des voies aériennes était étudiée grâce à l’étude cytologique du lavage bronchoalvéolaire et la mesure de l’expression et de la production pulmonaire cytokinique et chimiokinique. Les paramètres du remodelage bronchique étaient étudiés par méthode histologique et immunohistochimique. Résultats : Dans un premier temps, nous avons observé une persistance à des niveaux significativement élevés de l’hyperréactivité bronchique, de l’inflammation neutrophilique, de la surexpression du gène codant pour l’IL-17A, ainsi que de l’hyperproduction de mucus, de la fibrose sous-épithéliale et de l’hypertrophie du muscle lisse bronchique associés au remodelage bronchique. Dans un second temps, la neutralisation de l’IL-22 par l’anticorps n’a pas montré d’impact sur les principaux paramètres inflammatoires du modèle, mais induisait une diminution significative de l’hypertrophie du muscle lisse bronchique, et, dans une moindre mesure, de la fibrose sous-épithéliale. Conclusion : Le modèle murin d’asthme induit par l’allergène de chien est un modèle pertinent d’asthme sévère corticorésistant, et l’IL-22 pourrait être une cible thérapeutique intéressante dans le traitement du remodelage bronchique chez les patients asthmatiques sévères.

Résumé traduit

Background: Asthma is a common inflammatory disease of the lower airways in the general population. Among asthmatic patients, 5-10% develop severe forms, characterized by a poor response to inhaled corticosteroids. In these patients, airway remodelling is a phenomenon that worsens severe asthma-associated respiratory disability. However, airway remodelling remains an area of unmet therapeutic needs in the field of severe asthma treatment. Only scarce animal models accurately reproduce its pathological features, particularly in a context of T2low airway inflammation, which is characterized by a predominance of neutrophils and corticosteroid resistance. We developed a murine model of asthma, induced by dog allergen, that replicates the features of human airway remodelling in a context of neutrophilic and Th17 airway inflammation, associated with increased production of IL-17A and IL-22. Objectives: The objectives of our work were, first, to validate the relevance of this model as a model of severe corticosteroid-resistant asthma, and second, to study the therapeutic impact of IL-22 neutralization in this model.Methods: Asthma was induced by intranasal administration of dog allergen in C57BL/6J mice. During the final week of allergen challenge, mice received 1 mg.kg-1 of intraperitoneal dexamethasone to assess response to steroids. To evaluate the impact of IL-22 neutralization, mice received three 200 μg-doses of anti-IL-22 antibody every 48 hours during the final week of allergen challenge. Twenty-four hours after the last injection, airway hyperresponsiveness was evaluated by measuring airway resistances via tracheal canulation in response to increasing doses of nebulized methacholine. Airway inflammation was assessed through cytological analysis of bronchoalveolar lavage and measurement of pulmonary cytokine and chemokine expressions and productions. Airway remodelling parameters were studied using histological and immunohistochemical methods. Results: First, we observed a significant persistence of airway hyperresponsiveness, neutrophilic inflammation, overexpression of the gene encoding IL-17A, as well as mucus hyperproduction, subepithelial fibrosis, and airway smooth muscle hypertrophy associated with airway remodelling. Subsequently, antibody-mediated IL-22 neutralization had no impact on the main airway inflammatoryparameters of the model, but significantly reduced airway smooth muscle hypertrophy and, to a lesser extent, subepithelial fibrosis. Conclusion: The dog allergen-induced murine asthma model is a relevant model of severe corticosteroid-resistant asthma, and IL-22 may be a promising therapeutic target for treating airway remodelling in patients with severe asthma.