Note ABES Signature calcique de la synapse immunologique en pre?sence de l'axe PD-1/PD-L1 dans les leuce?mies aigue?s mye?loi?des Calcium signature of the immunological synapse in the presence of PD-1/PD-L1 axis in acute myeloid leukemia Calcium Synapse immunologique PD-1/PD-L1 Leucémie Myéloïde Calcium Immunological synapse PD-1/PD-L1 Leukemia Myeloid Leucémie aigüe myéloïde Immunologie Maladie résiduelle Immunologie Calcium Canaux calciques Inhibiteurs calciques Cellules cancéreuses Lymphocytes T Leucémie aigüe myéloïde immunologie Maladie résiduelle immunologie Signalisation calcique Canaux calciques Synapses immunologiques Récepteur-1 de mort cellulaire programmée Antigène CD274 Lymphocytes T Échappement de la tumeur à la surveillance immunitaire La leuce?mie aigue? mye?loi?de (LAM) est une maladie du sang causée par une accumulation de cellules immatures appelées cellules leucémiques (CL). Les thérapies conventionnelles comme les chimiothérapies ne permettent pas l'élimination de toutes les CL et leur persistance est appelée maladie minimale résiduelle (MRD). Cette MRD cause la rechute après traitement dans plus de 50% des cas dans un délai de 2 mois a? 5 ans malgré le fait que le système immunitaire (SI) adaptatif, et les lymphocytes T (LT) en particulier, participe a? l'e?limination ou a? la dormance/MRD (quiescence, contro?le de la croissance) des CL selon leurs proprie?te?s intrinse?ques (expression de certains re?cepteurs, statut prolife?ratif). Cela peut être dû à la persistance de cellules souches quiescentes et/ou CL pouvant présenter des mécanismes immunosuppresseurs tels que la signalisation PD-1/PD-L1 aboutissant à une dysfonction du SI via l'inhibition de l'activité des LT.La signalisation calcique et le facteur de transcription NFAT associé gouvernent de nombreuses fonctions cellulaires et mole?culaires et peuvent de?terminer le devenir de la cellule tumorale : prolife?ration, apoptose, quiescence et immunoéchappement. Ces signaux calciques sont toutefois peu e?lucide?s et ce qui peut réguler la résistance innée des cellules tumorales contre les LT n'est toujours pas connu à ce jour. Identifier les phénotypes responsables de cette résistance est essentiel dans la compréhension des mécanismes d'immunoéchappement comme la quiescence et l'expression de PD-L1.Pour cela, la signalisation calcique de lignées cellulaires de LAM et de patients atteints de LAM au diagnostic a été étudiée et a montré une spécificité de signature en fonction (i) du statut de différenciation, (ii) de la quiescence, (iii) de l'activité ABCB1 et de la sous-population cellules souches leucémiques (CSL).Il est également primordial de mieux comprendre le dialogue bilate?ral entre les cellules du SI adaptatif et les CL afin de pre?venir les rechutes chez les patients. La signature calcique de LT et CL de patients LAM a été étudiée en fonction de leur phénotype lors de la formation de la synapse immunologique afin de mettre en e?vidence une potentielle spe?cificite? de?pendante des proprie?te?s intrinse?ques des CSL et/ou des proprie?te?s des LT.Cette signalisation calcique a e?galement été e?tudie?e dans des conditions de modulation à l'aide (i) d'un inhibiteur des voies calciques et (ii) d'un traitement chimiothérapeutique afin d'apporter une meilleure compréhension de ces me?canismes re?gulateurs et de résistance des cellules persistantes.L'étude de la signalisation calcique des CL et l'utilisation de la technologie microfluidique afin d'étudier la réponse calcique de différentes synapses immunologiques en fonction des phénotypes des CL et LT à l'échelle de la cellule unique nous permet de mettre en évidence (i) l'implication des canaux SOCs dans la réponse calcique des CL et LT de patients LAM, (ii) une signature calcique liée à une synapse immunologique spécifique formée en fonction des sous-populations de CL et LT et (iii) une modulation de cette signature calcique des sous-populations et de leurs synapses immunologiques formées suite à un traitement avec un inhibiteur des canaux SOCs ou un traitement chimiothérapeutique.Ce projet multidisciplinaire pourrait donc, a? terme, apporter de nouvelles connaissances sur les me?canismes qui contro?lent l'e?chappement des CL et la MRD dans les LAM (quiescence des CSL, dormance immunologique via l'axe PD-1/PD-L1). Ces nouvelles connaissances pourraient offrir de nouvelles perspectives d'immunothérapies ou d'optimisation de protocoles de chimiothe?rapies et d'immunothe?rapies actuellement utilisés en clinique en proposant (i) de nouveaux traitements combinant le ciblage des canaux calciques aux the?rapies conventionnelles et/ou (ii) une immunothe?rapie de pre?cision. Acute myeloid leukemia (AML) is a blood disease caused by an accumulation of immature cells called leukemic cells (LCs). Conventional therapies such as chemotherapy do not eliminate all of the LCs and their persistence is called minimal residual disease (MRD). This MRD causes relapse after treatment in more than 50% of cases within 2 months to 5 years despite the fact that the adaptive immune system (IS), and T lymphocytes in particular, participates in the elimination or dormancy/MRD (quiescence, growth control) of LCs depending on their intrinsic properties (expression of certain receptors, proliferative status). This may be due to the persistence of quiescent stem cells and/or LCs that may exhibit immunosuppressive mechanisms such as the PD-1/PD-L1 signaling leading to IS dysfunction through the inhibition of T lymphocyte activity.Calcium signaling and the associated transcription factor NFAT govern many cellular and molecular functions and may determine tumor cell fate: proliferation, apoptosis, quiescence and immune escape. These calcium signals are, however, poorly elucidated and what may regulate the innate resistance of tumor cells against T lymphocytes is still not known to date. Identifying the phenotypes responsible for this resistance is essential in understanding immune escape mechanisms such as quiescence and PD-L1 expression.For this purpose, calcium signaling of AML cell lines and AML patients at diagnosis was studied and showed a signature specificity according to (i) differentiation status, (ii) quiescence, (iii) ABCB1 activity and leukemic stem cell (LSC) subpopulation.A better understanding of the two-way dialogue between adaptive IS cells and LCs is also crucial to prevent relapse in patients. The calcium signature of T lymphocytes and LCs from AML patients was studied according to their phenotype during the formation of the immunological synapse in order to highlight a potential specificity depending on the intrinsic properties of the LSC and/or the properties of the T lymphocytes.This calcium signaling was also studied under conditions of modulation with (i) a calcium pathway inhibitor and (ii) a chemotherapeutic treatment in order to provide a better understanding of these regulatory and resistance mechanisms of persistent cells.The study of LCs' calcium signaling and the use of microfluidic technology to study the calcium response of different immunological synapses according to LCs and T lymphocytes phenotypes at the single cell level allows us to demonstrate (i) the involvement of SOC channels in the calcium response of AML LCs and T lymphocytes, (ii) a calcium signature linked to a specific immunological synapse formed according to the LCs and T lymphocytes subpopulations and (iii) a modulation of the subpopulations' calcium signature and immunological synapses formed following a treatment with an inhibitor of the SOC channels or a chemotherapeutic treatment. This multidisciplinary project could therefore ultimately provide new insights into the mechanisms controlling LCs escape and MRD in AML (LSC quiescence, immunological dormancy via the PD-1/PD-L1 axis). This knowledge could offer new perspectives for immunotherapies or optimization of chemotherapy and immunotherapy protocols currently used in the clinic by proposing (i) new treatments combining calcium channel targeting with conventional therapies and/or (ii) precision immunotherapy. Electronic Thesis or Dissertation Text Image fr en PDF 19606909 https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/EDBSL/2023/2023ULILS017.pdf https://theses.hal.science/tel-04474969 https://theses.hal.science/tel-04474969 https://theses.hal.science/tel-04474969 https://theses.hal.science/tel-04474969 https://theses.fr/2023ULILS017/abes https://theses.hal.science/tel-04474969 https://theses.hal.science/tel-04474969 https://theses.hal.science/tel-04474969 Put in a “Ca2+ll” to Acute Myeloid Leukemia Clara Lewuillon Marie-Océane Laguillaumie Bruno Quesnel Thierry Idziorek Yasmine Touil Loïc Lemonnier MDPI en 2022 Text Pairing cells of different sizes in a microfluidic device for immunological synapse monitoring Faruk Azam Shaik Clara Lewuillon Aurélie Guillemette Bahram Ahmadian Carine Brinster Bruno Quesnel Dominique Collard Yasmine Touil Loïc Lemonnier Mehmet Cagatay Tarhan Royal Society of Chemistry en 2022 Text Involvement of ORAI1/SOCE in Human AML Cell Lines and Primary Cells According to ABCB1 Activity, LSC Compartment and Potential Resistance to Ara-C Exposure Clara Lewuillon Aurélie Guillemette Sofia Titah Faruk Azam Shaik Nathalie Jouy Ossama Labiad Valerio Farfarellio Marie-Océane Laguillaumie Thierry Idziorek Adeline Barthélémy Pauline Peyrouze Céline Berthon Mehmet Cagatay Tarhan Meyling Cheok Bruno Quesnel Loïc Lemonnier Yasmine Touil MDPI en 2022 Text Lewuillon Clara 1996-02-16 FR 270929029 0907033550H 112432 https://theses.fr/2023ULILS017 2023ULILS017 https://doi.org/10.70675/fd3952fazb038z48a2z87a4z0b092ec61453 2023-04-04 Biologie cellulaire et moléculaire Université de Lille (2022-....) 259265152 Doctorat Docteur es oui oui Touil Yasmine MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 132475618 Manier Salomon MADS_PRESIDENT_DU_JURY 201427370 Garçon Loïc MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 161279333 Lemonnier Loïc MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 079563805 Ouadid-Ahidouch Halima MADS_RAPPORTEUR_1 111696763 Penard-Lacronique Virginie MADS_RAPPORTEUR_2 113272014 École graduée Biologie-Santé (Lille ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 446 147705126 Hétérogénéité, plasticité et résistance aux thérapies des cancers (CANTHER) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 9020 249814935 Cancer Heterogeneity, Plasticity and Resistance to Therapies - UMR 9020 - U 1277 MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_2 1004619 ddc:610 Touil Yasmine Manier Salomon Garçon Loïc Lemonnier Loïc Ouadid-Ahidouch Halima Penard-Lacronique Virginie École doctorale Biologie-Santé (Lille) Hétérogénéité, plasticité et résistance aux thérapies des cancers (CANTHER) Cancer Heterogeneity, Plasticity and Resistance to Therapies - UMR 9020 - U 1277 PDF 19606909