Note ABES Valorisation du glycérol par catalyse enzymatique Enzymatic valorization of glycerol Aldolases Rétroaldolisation 660.634 Biocatalyse Glycérine Oxydation Oxydoréductases Mutagénèse dirigée Bioinformatique Simulation de docking moléculaire Depuis les années 90, la production mondiale de biodiesel ne cesse d’augmenter passant de 15000 à plus de 430000 barils par jour. Lors de la synthèse des biodiesels, « un déchet » est produit à hauteur de 10 %, le glycérol, ce qui représente une manne financière importante. Ce travail de thèse, financé par la SAS PIVERT, a eu pour objectif de valoriser ce glycérol en glyoxal, une molécule plate-forme, en utilisant la catalyse enzymatique. Trois réactions ont été étudiées : une première concernant l’oxydation du glycérol en glycéraldéhyde, une seconde réaction de clivage du glycéraldéhyde en glycolaldéhyde et une troisième réaction d’oxydation du glycolaldéhyde en glyoxal. Les enzymes qui catalysent ces réactions ne sont pas commerciales, nous avons donc développé deux approches pour rechercher ces enzymes. Concernant les oxydases, un programme bio-informatique a été développé pour rechercher une activité enzymatique cible dans la biodiversité. En ce qui concerne la réaction de clivage du glycéraldéhyde, nous avons opté pour une approche de mutagénèse dirigée à partir de la fructose-6-phosphate aldolase basée sur des études de docking. Cette enzyme a été choisie grâce à une étude bibliographique. En effet, elle possédait de nombreux critères indispensables pour notre étude. Ce travail a permis, au sein de notre laboratoire, de développer de nouvelles approches de recherche d’activités enzymatiques dans la biodiversité et une automatisation complète de tout le processus de bio-informatique et de biologie moléculaire. Since 90s, biodiesel production increase from 15000 to 430000 barrels per day. However, during biodiesel synthesis, one molecule is produced at 10 %, the glycerol which represent an important financeable windfall. This project, funded by SAS PIVERT, was devoted to valorize glycerol into glyoxal, a building block, by enzymatic cascade. Three enzymatic reactions were studied, first glycerol oxidation into glyceraldehyde, second glyceraldehyde cleavage into glycolaldehyde and to finish a last oxidation reaction of glycolaldehyde to give the glyoxal. We haven’t found commercial enzymes able to catalyze these reactions. To find it, we have developed two different approaches. A bio-informatic program was created to search oxidase activity in biodiversity. A site directed mutagenesis method was developed from fructose-6-phosphate aldolase based on docking studies. This enzyme have been selected as started point after bibliographic research due to its characteristics. This PhD work has allowed to develop, in our laboratory, new approaches to research enzymes activity in biodiversity and a complete automation of the bio-informatic and molecular biology processes. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 25108550 text/html https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/EDSMRE/2018/50376-2018-De_Sousa_Lopes_Moreira.pdf https://theses.fr/2018LILUR044/abes De Sousa Lopes Moreira Maxime De Sousa Lopes Moreira 1992-03-15 FR 234419415 https://theses.fr/2018LILUR044 2018LILUR044 https://doi.org/10.70675/b94821f5zb04fz4069z9ad8z2a2ec6b3cc2e 2018-11-28 Biotechnologies agroalimentaires, sciences de l’aliment Université de Lille (2018-2021) 223446556 Doctorat Docteur es non oui Froidevaux Rénato MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 060943157 École doctorale Sciences de la matière, du rayonnement et de l'environnement (Lille ; 1992-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 148937330 Institut Charles Viollette MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 189544864 Procédés biologiques et génie enzymatiques et microbien (ProBioGEM) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_2 161622135 ddc:660 Froidevaux Rénato École doctorale Sciences de la matière, du rayonnement et de l'environnement (Villeneuve d'Ascq, Nord) Institut régional de recherche Charles Viollette Procédés biologiques et génie enzymatiques et microbien (ProBioGEM) PDF 25108550