Note ABES Activité antitumorale des isoformes de la lactoferrine, une approche comparative et quantitative Antitumoral activity of lactoferrin isoforms, a comparative and quantitative approach Marquage métabolique 572.68 Lactoferrines Protéomique Antigènes tumoraux Immunomodulateurs Cellules Marquage Facteurs de transcription Glycosylation Marqueurs tumoraux La transcription du gène lactoferrine conduit à deux isoformes : une sécrétée, la lactoferrine (Lf) et une intracellulaire, la delta lactoferrine (?Lf). La Lf est dotée de nombreuses propriétés parmi lesquelles des activités immunomodulatrice et anticancéreuse. La ?Lf possède une activité anticancéreuse via son activité transcriptionnelle. Ce sont des suppresseurs de tumeur potentiels dont l’expression est sous-régulée dans le cas de cancer. Elles sont considérées comme des marqueurs sains car leur expression est corrélée à un facteur de bon pronostic dans le cancer du sein. Au cours de la thèse, j’ai développé la PCR quantitative Taqman afin de distinguer les deux isoformes et étudié leur expression dans le cas de cancer et dans un contexte inflammatoire. Puis j’ai étudié le protéome de cellules HEK-293 exprimant la ?Lf par électrophorèse 2-D et spectrométrie de masse. J’ai ainsi mis en évidence une nouvelle cible de l’activité transcriptionnelle de la ?Lf, DcpS, enzyme clé de la maturation des ARNm. En parallèle, ces travaux ont montré une régulation de la stabilité et de l’activité transcriptionnelle de la ?Lf par la O-GlcNAcylation. Enfin, j’ai étudié les effets différentiels des isoformes de la Lf dans les cellules de glande mammaire cancéreuse MDA-MB-231 via une approche protéomique basée sur le SILAC et la spectrométrie de masse, en collaboration avec l’équipe du Dr. Monsarrat (IPBS, Toulouse). 5030 protéines ont pu être identifiées et quantifiées. Ces travaux ont permis d’identifier le gène SelH en tant que cible de l’activité transcriptionnelle de la Lf et de la ?Lf, suggérant que la Lf sécrétée possède également un rôle de facteur de transcription. Transcription of the lactoferrin gene results in the production of two isoforms: a secreted lactoferrin (Lf) and intracellular delta-lactoferrin (?Lf). Lf has numerous functions including immunomodulatory and antitumoral activities. We showed that ?Lf is a transcription factor, the only activity it shares with Lf being its anticancer activity. Lf and ?Lf are potential tumor suppressors whose expression is downregulated in the case of cancer. They may be considered as healthy markers, the expression of which is correlated with a good prognosis in breast cancer. During my PhD thesis, We developed quantitative Taqman PCR assay to evaluate the level of expression of the transcripts of the two Lf isoforms in case of cancer or in an inflammatory context. We then studied the proteome profile of ?Lf-expressing cells using 2-D electrophoresis and mass spectrometry analyses. Our data established that DcpS, a key enzyme in mRNA decay, is a new target of ?Lf transcriptional activity. In parallel, we demonstrated that ?Lf stability and transcriptional activity are regulated by O-GlcNAcylation. Finally, We compare the differential effects of the two antitumoral isoforms on the cancerous mammary gland MDA-MB-231 cell line. We used a high-throughput proteomic approach (Stable Isotope Labelling with Amino acids in Cell culture, SILAC) coupled to mass spectrometry to carry out highly accurate quantitative and systematic proteome profiling in collaboration with the team of Dr. Monsarrat (IPBS, Toulouse). Our study allowed the identification of SelH, a thioredoxin like protein, as a target of both Lf and ?Lf transcriptional activity and suggested that secreted Lf acts as a transcription factor. Electronic Thesis or Dissertation Text fr en PDF 47745937 https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/EDBSL/2012/50376-2012-Hoedt.pdf https://theses.fr/2012LIL10017/abes Discrimination and evaluation of lactoferrin and delta-lactoferrin gene expression levels in cancer cells and under inflammatory stimuli using TaqMan real-time PCR Hoedt Esthelle Hardivillé Stephan Mariller Christophe Elass E. Perraudin Jean-Paul Pierce Annick Biometals en 2010 Text Proteomic approach to the identification of novel delta-lactoferrin target genes: characterization of DcpS, an mRNA scavenger decapping enzyme Mariller Christophe Hardivillé Stephan Hoedt Esthelle Benaïssa Monique Mazurier Joël Pierce Annick Biochimie en 2009 Text O-GlcNAcylation/phosphorylation cycling at ser10 controls both transcriptional activity ans stability of delta-lactoferrin Hardivillé Stephan Hoedt Esthelle Mariller Christophe Benaïssa Monique Pierce Annick Journal of biological chemistry en 2010 Text Delta-lactoferrin, an intracellular lactoferrin isoform that acts as a transcription factor Mariller Christophe Hardivillé Stephan Hoedt Esthelle Huvent Isabelle Pina-Canseco Socorro Pierce Annick Biochemistry and cell biology en 2012 Text Hoedt Esthelle Hoedt 1983-08-28 FR 165249242 https://theses.fr/2012LIL10017 2012LIL10017 https://doi.org/10.70675/6f75c2c6z7a94z4550z8d0az30d431eb5626 2012-03-15 Sciences de la Vie et de la Santé Lille 1 026404184 Doctorat Docteur es oui oui Pierce-Crétel Annick MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 029719534 Mariller Christophe MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 121612783 École graduée Biologie-Santé (Lille ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 147705126 Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle (Villeneuve d'Ascq ; 1998-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 134442571 ddc:570 Pierce Annick Mariller Christophe École doctorale de Biologie-Santé (Lille) Unité de glycobiologie structurale et fondamentale (UGSF) ASCII PDF 47745937