Note ABES Analyse structurale et fonctionnelle des glycolipides pariétaux de Mycobacterium marinum : une mycobactérie modèle dans l’étude de la tuberculose Structural and functional analysis of Mycobacterium marinum cell wall glycolipids : a mycobacterial model to study tuberculosis Lipooligosaccharides Polar and apolar glycolipids Mycobacterium marinum Glycolipides Structure Tuberculose Physiopathologie Granulome Immunomodulation Paroi bactérienne Relations hôte-bactérie Danio rerio Mycobacterium marinum est une mycobactérie pathogène des ectothermes génétiquement proche de M. tuberculosis. Ce modèle peut être utilisé pour mieux comprendre la formation des granulomes tuberculeux et déterminer le rôle des glycoconjugués pariétaux dans la régulation de la réponse immunitaire. Dans ce contexte, nos travaux ont porté sur la purification des glycolipides polaires et apolaires extraits de la paroi de M. marinum et leur caractérisation en utilisant la résonance magnétique nucléaire et la spectrométrie de masse. Nos résultats concernant l’analyse structurale de la famille des lipooligosaccharides polaires (LOSs, comprenant les LOS-I à LOS-IV) ont démontré la présence de monosaccharides rares, dont le caryophyllose et un monosaccharide N-acylé, spécifique du LOS-IV. Nous avons également observé que tous les LOSs inhibent la sécrétion macrophagique d’une cytokine pro-inflammatoire, le TNF-????. En revanche, seul le LOS-IV stimule l’expression d’antigènes (ICAM-1 et CD40) à la surface des macrophages et la production de chimiokine (IL-8). Cet effet inducteur du LOS-IV pourrait être lié à la présence du monosaccharide terminal N-acylé. Par ailleurs, les autres glycolipides polaires analysés, incluant les phosphatidyl-myo-inositol mannosides (PIM), le lipomannane (LM) et le lipoarabinomannane (LAM), possèdent des structures similaires à celles de M. tuberculosis.L’étude des glycolipides apolaires a permis de préciser la structure des glycolipides phénoliques (PGL) et des tréhaloses di-mycolates (TDM). De plus, une famille de glycolipides méconnue comprenant le Di-Mycolyl-Di-Arabinoglycérol (DMDA) a été identifiée. Le DMDA présente une structure très proche de la partie terminale du mycolyl-arabinogalactane-peptidoglycanne (mAGp), macro-complexe pariétal majoritaire des mycobactéries. Des études complémentaires effectuées chez M. bovis BCG ont démontré que ce glycolipide était lié au métabolisme du mAGp, ce qui ouvre de nouvelles pistes pour la compréhension du mode d’action de certaines drogues anti-tuberculeuses telles que la thiacétazone. Mycobacterium marinum is a natural pathogen of ectotherms genetically close to M. tuberculosis. This pathogen model is useful for deciphering the role of mycobacterial cell wall glycolipids in granulomatous infection. In this context, our work focused on the purification of both polar and apolar glycolipids extracted from M. marinum cell wall and their structural characterization using nuclear magnetic resonance and mass spectrometry. Analysis of the polar lipooligosaccharide family (LOSs, including LOS-I to LOS-IV) demonstrated the presence of several rare or even unique monosaccharides including caryophyllose, derivatives and a N-acylated monosaccharide specific of LOS-IV. Biological activity assays showed that LOSs exert an important pro-inflammatory effect by decreasing the TNF-? secretion from macrophages. Moreover, LOS-IV was found to stimulate the expression of the chemokine IL-8 and cell surface antigens (CD40 and ICAM-1) on macrophages. This specific immunostimulatory property was related to the presence of the terminal N-acylated monosaccharide in LOS-IV. In addition, other polar glycolipids analyzed, including phosphatidyl-myo-inositol mannosides (PIM), lipomannane (LM) and lipoarabinomannan (LAM), possess similar structures than M. tuberculosis. The study of apolar glycolipids permitted to precise the structure of phenolic glycolipids (PGL) and trehalose di-mycolates (TDM). Moreover, a family of unusual glycolipids, including Di-Mycolyl-Di-Arabinoglycérol (DMDA), was identified. DMDA structure is very close from the terminal part of peptidoglycan-arabinogalactan-mycolyl (mAGp), the mycobacterial cell wall macro-complex. Additional studies performed in M. bovis BCG showed that this glycolipid is related to mAGp, providing new insights about the mode of action of anti-tuberculous drugs such as thiacetazone. Electronic Thesis or Dissertation Text fr en PDF 25596323 https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/EDBSL/2010/50376-2010-Rombouts.pdf https://theses.fr/2010LIL10145/abes Mycobacterium marinum lipooligosaccharides are unique caryophyllose-containing cell wall glycolipids that inhibit tumor necrosis factor-alpha secretion in macrophages Rombouts, Yoann Burguière, Adeline Maes, Emmanuel Coddeville, Bernadette Elass, Elisabeth Guérardel, Yann Kremer, Laurent Journal of biological chemistry en 2009 Text Structural analysis of an unusual bioactive N-acylated lipooligosaccharide LOS-IV in Mycobacterium marinum Rombouts, Yoann Elass, Elisabeth Biot, Christophe Maes, Emmanuel Coddeville, Bernadette Burguière, Adeline Tokarski, Caroline Buisine, Eric Trivelli, Xavier Kremer, Laurent Guérardel, Yann Journal of the american chemical society en 2010 Text Rombouts Yoann Rombouts 1984-10-12 FR 153100370 https://theses.fr/2010LIL10145 2010LIL10145 https://doi.org/10.70675/94dc6fa4z13afz4a52za303z6fdce9cb1d36 2010-12-07 Sciences de la vie et de la santé Lille 1 026404184 Doctorat Docteur es oui oui Guérardel Yann MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 071068708 Elass-Rochard Elisabeth MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 060145773 École graduée Biologie-Santé (Lille ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 147705126 ddc:570 Guérardel Yann Elass-Rochard Elisabeth École doctorale Biologie-Santé (Lille) PDF 25596323