Note ABES Stratégie moléculaire de mise en évidence de peptides actifs d’origine non ribosomiale chez Bacillus sp. et Lactobacillus sp. Molecular strategy of non ribosomal active peptides detections in Bacillus sp. and Lactobacillus sp. strains Peptides non ribosomiaux Kurstakines Lipopeptides Synthèse (chimie) ADN -- Amplification Clonage moléculaire PCR (génétique) Lactobacilles Biotechnologie Bacillus (bactéries) Biotechnologie Bioinformatique Les synthétases non ribosomiales sont des complexes multienzymatiques qui synthétisent des peptides atypiques par un mécanisme de thiotemplate indépendant des ribosomes. Ces peptides possèdent un large spectre d’activités biologiques et sont utilisés dans les domaines de la médecine et de la recherche biologique. Leur application dans d’autres domaines comme l’agriculture et l’environnement est de plus en plus envisagée à cause des fonctions diverses et de leur innocuité par rapport aux analogues chimiques. Plusieurs bactéries (levures et champignons) posséderaient la capacité de synthétiser ces molécules particulières.Nos travaux se sont concentrés sur la mise au point d’une nouvelle approche moléculaire de criblage par la réaction de polymérisation en chaîne, dans le but de détecter des souches de Lactobacillus et de Bacillus capables de produire ces peptides particuliers. Ainsi, plusieurs couples d’amorces dégénérées spécifiques (As1-F/Ts2-R, Am1-F/Tm1-R, Af2-F/Tf1-R, Ap1-F/Tp1-R) ont été définis à partir des gènes connus de synthétases impliquées dans la biosynthèse de ces molécules. Ces amorces ont permis de révéler le potentiel de synthèse de molécules non ribosomiales de Bacillus cereus LMG 2098 et de Bacillus thuringiensis serovar berliner 1915puis ont confirmé la présence de gènes NRPS dans d’autres bacilles déjà connus pour leur synthèse. La combinaison de ce criblage moléculaire avec les analyses biochimiques classiques a permis de montrer que la kurstakine présente chez B. thuringiensis serovar berliner 1915 est synthétisée par voie non ribosomiale Non-ribosomal peptide synthetases (NRPS) are multimodular enzymes that make atypical peptides through a thiotemplate mechanism independent of ribosomes. These peptides have a broad spectrum of biological activities. Since several ten years, they are used in the fields of medicine and the biological research. They also have a lot of potential applications in the agricultural and environmental fields. Several bacteria would have the capacity to synthesize these particular molecules. To detect Lactobacillus and Bacillus strains able to produce these peptides, a new Polymerase Chain Reaction screening approach was developed using degenerated primers based on the intra-operon alignment of adenylation and thiolation nucleic acid domains of enzymes implicated in the biosynthesis of these peptides.This work led to the discovery of the presence of many non-ribosomal peptides in Bacillus strains, particular kurstakins in Bacillus thuringiensis serovar berliner 1915. Electronic Thesis or Dissertation Text fr en PDF 19554679 https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Autres/2010/50376-2010-Tapi.pdf https://theses.fr/2010LIL10002/abes New approach for the detection of non-ribosomal peptide synthetase genes in Bacillus strains by polymerase chain reaction Arthur tapi Marlène Chollet-Imbert Bart Scherens Philippe Jacques Applied microbiology and biotechnology en 2009 Text Tapi Arthur Tapi 1975-04-18 Autre 149001630 https://theses.fr/2010LIL10002 2010LIL10002 https://doi.org/10.70675/e56b5fd6za301z4a3dza6e2z3de4f0390c93 2010-01-21 Ingénierie des fonctions biologiques Lille 1 026404184 Doctorat Docteur es oui oui Jacques Philippe MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 139643079 ddc:660 Jacques Philippe ASCII PDF 19554679